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高效液相色谱和气相色谱的异同点
不同点:
一、流动相不同:HPLC 为液体流动相,GC 为永久性气体作流动相(通常叫做
载气)
二、进样器不同:高效液相为平头进样针,气相色谱为尖头进样针
三、色谱柱长不同:
(1)气相色谱柱通常几米到几十米
(气相色谱由于载气的相对分析量较低,分子间隙大,故粘度低,流动性好,组
分在气相中流动速度快,因此可以增加柱长,以提高柱效)。
(2 )液相色谱柱通常为几十到几百毫米
四、分析种类有差异:
气相色谱分析的对象多为(不适绝对):分子质量小于1000,低沸点,易挥发,
热稳定性好的化合物。
液相色谱:更适用于分析高沸点,难挥发,热稳定性差,分子质量较大(1000 -
-2000 )的液体化合物。
五:样品柱前变化不同:气相色谱的样品在柱前必须变为气体(气化室汽化),
而液相色谱的样品在柱前则无变化。
六、所用检测器有差异:
液相主要为:紫外检测器,荧光检测器、示差折光检测器
气相色谱主要为:氢火焰离子化检测器(FID),热导检测器(TCD ),电子捕获
检测器(ECD),火焰光度检测器(FPD),氮磷检测器(NPD)
相同点:基本原理相同。
都是利用物质在流动相和固定相中的分配系数的差别,从而在两相间反复多次
(1000-1000000 次,甚至更多)的分配,使原来分配系数差别很小的各组分分
离开来。
❖ Owen 发现异卵双生牛的天然免疫耐受现象(1945),明确自身识别问题,
伯耐特(Burnet,1949)提出免疫耐受理论,梅德华(Medawar,1953)实
验证实胚胎期耐受理论。耶那(Jerne,1955)提出天然抗体选择学说,完
成免疫网络学说(1974),伯耐特等(Burnet & Talmage, 1957)完善克隆选
择学说等
免疫防御(immunologic 抗感染
defense)
1
免疫稳定(immunologic 消除炎症或衰老细胞
homeostasis)
免疫监视(immunologic 控制癌变细胞
surveilance)
1.高压:液相色谱法以液体为流动相(称
为载液),液体流经色谱柱,受到阻力较
大,为了迅速地通过色谱柱,必须对载液
施加高压。一般可达 150~3.5 万KPa。
2. 高速:流动相在柱内的流速较经典
色谱快得多,一般可达 1~10ml/min。高
效液相色谱法所需的分析时间较之经典液
相色谱法少得多,一般少于 1h 。
3. 高效:近来研究出许多新型固定
相,使分离效率大大提高。
4.高灵敏度:高效液相色谱已广泛采
用高灵敏度的检测器,进一步提高了分析
的灵敏度。如荧光检测器灵敏度可达
10-11g。另外,用样量小,一般几个微升。
5.适应范围宽:气相色谱法与高效液
相色谱法的比较:气相色谱法虽具有分离
2
能力好,灵敏度高,分析速度快,操作方
便等优点,但是受技术条件的限制,沸点
太高的物质或热稳定性差的物质都难于应
用气相色谱法进行分析。而高效液相色谱
法,只要求试样能制成溶液,而不需要气
化,因此不受试样挥发性的限制。对于高
沸点、热稳定性差、相对分子量大(大于
400 以上)的有机物(这些物质几乎占有
机物总数的 75% ~ 80% )原则上都可应
用高效液相色谱法来进行分离、分析。 据
统计,在已知化合物中,能用气相色谱分
析的约占20%,而能用液相色谱分析的约
占70~80%。
高效液相色谱按其固定相的性质可分
为高效凝胶色谱、疏水性高效液相色谱、
反相高效液相色谱、高效离子交换液相色
谱、高效亲和液相色谱以及高效聚焦液相
色谱等类型。用不同类型的高效液相色谱
分离或分析各种化合物的原理基本上与相
对应的普通液相层析的原理相似。其不同
之处是高效液相色谱灵敏、快速、分辨率
高、重复性好,且须在色谱仪中进行。
3
编辑本段主要
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