如何建立腹膜炎相关科研课题.ppt

小结 大肠杆菌是我中心革兰阴性菌腹膜炎的主要致病菌（ 60% ），其比例远 高于其他研究报道（21% ~ 43%)。 采用头孢拉定或头孢唑林联合头孢他啶腹腔内给药的经验性治疗可以取得较好的临床结局。 基线合并症的严重程度、高龄、糖尿病以及腹膜炎时低白蛋白血症与大肠杆菌腹膜炎的治疗失败有关。 产ESBL大肠杆菌菌株常见；腹膜炎病史显著增加大肠杆菌腹膜炎时分离出产ESBL菌株的风险。 Feng XR, Yang X, et al. Perit Dial Int 2014 Feb 4 存在的局限性 回顾性研究； 发生治疗失败例数较少，不适宜做多因素logistic回归分析； 未分析大肠杆菌菌株基因型； 培养阴性率为21%，略超过ISPD推荐的上限（20%）。 实验性研究 腹膜透析相关性大肠杆菌腹膜炎的发病机制 长期腹透削弱了腹腔巨噬细胞的吞噬功能 Incident PD pts Long term PD pts 与长期透析病人相比（右图），新病人具有更强的吞噬能力 (左图) 吞噬了 E. coli 的巨噬细胞（黄色箭头） 长程腹透降低了腹腔巨噬细胞的杀菌功能 巨噬细胞中吞噬E.coli数（cfu） 30min 90min 新腹透病人 350,000 165,000 长期透析病人 500,000 425,000 新腹透患者及长期稳定透析患者腹腔巨噬细胞杀菌能力 Patients without peritonitis LPS Pam3CSK4 Patients with peritonitis TNF-α IL-6 TNF-α TNF-α TNF-α IL-6 与非腹膜炎患者腹腔巨噬细胞比较，腹膜炎患者腹腔巨噬细胞LPS 或 Pam3CSK4 刺激下TNF-α表达显著降低 TNF-α: LPS： 33.35±13.41 vs. 4.97±4.85 % P0.01； Pam3CSK4： 34.23±10.45 vs.7.01±6.97%, P0.01 IL-6: LPS： 6.87±4.29 vs. 3.19±1.74% P0.05；Pam3CSK4： 6.19±2.59 vs. 4.93±3.57% ,P0.05 Flow cytometry 腹膜间皮细胞吞噬和自噬 PMC Bacterium phagocytized by PMC Bacteria were incapsuled by double membranes of autophagosome Multiplication of bacteria within the cell Transmission electron micrographs : Figure A shows that E. coli particles were phagocytized and destroyed by PMC. Figure B shows that the E.coli bacteria were phagocytized and encapsulated by autophgosomes without fusion with lysosomes in PMC and the bacteria were multiplied in autophgosomes. A B 大肠杆菌腹膜炎: 临床治愈的病例 Magnification ×21000 magnification ×15500 Representative electron micrograph of peritoneal mesothelial cells from the patients: An autophagic vacuoles containing some organelles (left panel). An autolysosome (right panel). 大肠杆菌腹膜炎: 治疗失败的病例 Representative electron micrograph of peritoneal macrophages: rod bacteria were engulfed inside autophagic vacuole and the bacterial body was digested. magnification ×8900 magnification ×21000 研究假说 E.coli菌株所携带的毒力因子是损伤肠道粘膜屏障，导致细菌自胃肠道迁移至腹腔的重要原因。 腹膜透析患者腹膜腔先天免疫和获得性免疫功能的低下，是E.coli腹膜炎的易患因素之一。 研究目