免疫组化技术常见问题及处理方法.pptx

免疫组化技术常见问题及处理方法;免疫组织化学的定义;免疫组织化学的原理;;免疫组织化学的分类;;可被检测的物质;免疫组织化学的特点 ;Western blotting、ELISA与免疫组化的异同;免疫组织化学方法的基本步骤;鼠单克隆抗体或多克隆抗体（兔抗血清）;SP法;;二步法(Envision系统);Envision系统的优点;石蜡切片标本的固定;固定不充分;;;;;;;;标本的取材、脱水、浸蜡;标本的切片、捞片、烤片;冰冻切片的处理;细胞涂片的处理;抗原修复;抗原修复的方法;热抗原修复;高压锅热抗原修复;高压锅热抗原修复;热??原修复：注意事项;热抗原修复存在的问题;修复过度的实验组;修复过度的实验组;修复过度的对照组;修复过度的对照组;酶消化修复;缩短修复时间; 热修复抗原会导致内源性生物素反应增强，应用卵白素抗生物素系统会产生假阳性 　　富含内源性生物素的组织： 　　 — 肝细胞 　 — 线抗体丰富的组织如肾脏、甲状腺、嗜酸细胞等 　　 — 胞浆丰富的肿瘤细胞 ; 组织在热修复之后，用3％的新鲜H2O2进行封闭， 以阻断内源性过氧化物酶的活性，室温下孵育10min，再用10％鸡（鸭）蛋清阻断10～15分钟，清洗后滴加一抗 应用非生物素系统的检测试剂盒，如EnVision系统 ;热抗原修复的缓冲液;抗体孵育条件;复温的必要性;脱片产生的原因和如何防止脱片;背景染色较深的原因;;DAB染色后切片着色呈阴性结果;DAB显色时间的把握;免疫组化对照和质量控制;;;;;;脱水、透明、封片、拍照;免疫组化染色的评分;免疫组化染色的评分;;;免疫组织化学方法的基本步骤;Envision系统的优点;抗原修复的方法;修复过度的实验组;修复过度的对照组;背景染色较深的原因