水产微生物实训五微生物培养基的配制技能实训培养基的配制.pdf

水产养殖课程名 称 主讲人： 2016年12月30 日  1、什么是培养基？培养基的种类？  2、配置培养基的一般方法和步骤。  通过营养琼脂培养基的配制，掌握配制培养基的一 般方法和步骤 。  包括：称量、溶化、（过滤）、调pH、分装、包装、 灭菌、（摆斜面或倒平板）。  牛肉膏3.0g ，  蛋白胨10.0g，  NaCl 5.0g，  琼脂18.0g，  蒸馏水1000mL，  pH 7.2～7.4  1、称量： 按实际用量计算后，按配方称取各种药品放入大烧杯中 牛肉膏可放在小烧杯或培养皿中称量，用热水溶解后到入大烧杯  2.加热溶化：  在烧杯中加入少于 所需的水量，然后 放在石棉网上加热， 并用玻璃棒搅拌， 待药品完全溶解后 再补充水分至所需 量。  3 . 调 pH：用试纸检测培养基的 pH，并用 1mol/LNaOH或1mol/LHCL调至所需的pH值。应 注意避免回调。  4.分装：按实验要 求将配制的培养基 分装入试管或三角 瓶内。 分装架的组成 固体培养基约为试管高度的1/5，三角瓶以不超过一半为宜。  5.加塞：试管要加上 硅胶塞，三角瓶要加 棉塞。  每组配200mL培养基，先分装10支试管，剩下的 培养基全部装入三角锥瓶中，加上配套的硅胶塞上 交，等待灭菌。  6、灭菌：将上述的培养基于121℃湿热灭菌20分钟。  7、灭菌后的培养基要及时摆斜面或倒平板。 摆 斜 面 倒 平 板 右手托住三角锥瓶底，左手拔瓶塞。 将三角锥瓶口用酒精灯火焰灼烧消毒。 将三角锥瓶换至左手拿，用右手执灭菌培养皿倒入温度适宜的培养基 摇匀培养皿中的培养基后，三角锥瓶口要再次过火消毒。  1.配制培养基后为什么必须立即灭菌？若不能及时 灭菌应如何处理？  2.已灭菌的培养基如何进行无菌检查？