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白芷扩增片段长度多态性反应体系的建立及优化 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：白芷扩增片段长度多态性反应体系的建立及优化 1 1 材料与仪器 3 2 方法 3 3 结果 6 4 讨论 8 文2：川芎简单序列重复间区多态性和扩增片段长度多态性分子标记技术多 9 1 材料 10 2 方法 10 3 结果 12 4 讨论 13 参考文摘引言： 14 原创性声明（模板） 15 文章致谢（模板） 15 正文 白芷扩增片段长度多态性反应体系的建立及优化 文1：白芷扩增片段长度多态性反应体系的建立及优化 Abstract：ObjectiveTo establish an optimized AFLP(amplified fragment length polymorphism) analysis system of Angelica optimized AFLP analysis system was established with 12 Angelica dahuruica from different habitats after a comparative study of the essential facto which influenced the results of AFLP method. ResultsThe improved CTAB conventional method was better to AFLP than SDS method. The results of the analysis system showed that 1)the dosage of template DNA was 400ng; 2) the time of digest system was 4h; 3) the products of preamplification should be diluted to 10 times; 4)seven pai of primer(E+AGC/M+CAA,E+ACT/M+CAC,E+AGC/M+CAC,E+AAC/M+CAC,E+ACC/M+CAC,E+AAC/M+CAG,E+ACC/M+CTC)were selected from 64 pai by screening repeatedly. And E+AGC/ M+CAA could amplify more uniform and high sharp bands. ConclusionOur study showed that the AFLP was suitable for genetic diveification,variety identification,cotruction of molecular map , identification and classification. These results provide fundamentals for further molecular studies of Angelica dahuruica using AFLP marker. Key words：AFLP system; Angelica dahuruica 扩增片段长度多态性（amplified fragment length polymorphism, AFLP）技术作为一项分子标记技术，是1992年由荷兰Keygene公司 科学 家Zabeau Mare和Vos pieter 发明并 发展 起来的一种选择扩增限制性酶切片段的方法［1］。AFLP是基于RFLP ( Restriction Fragment Length Polymorphism) 和PCR(Polymerase Chain Reaction) 相结合的DNA 分析技术。这种方法是一种选择性扩增限制性片段的方法,它结合了RFLP 和RAPD 的优点,既具有前者的可靠性，又具有后者的方便性。现已被广泛应用于生物多样性、指纹图谱构建、遗传图谱构建、基因克隆等诸多领域［2］ 白芷Angelica dahurica为伞形科植物，是一种常用中药，性温，味辛，具有散风除湿、通窍止痛、消肿排脓的功效。目前对白芷的研究主要集中在白芷的品质、化学成分、药理作用等方面，其种质资源多样性、亲缘关系等方面的研究也有一些报道［3，4］，但是运用AFLP技术对白芷基因组的研究还未见报道。因此本研究旨在建立一套适合于白芷的AFLP实验体系，并筛选出多态性强的引物，为进一步研究白芷的遗传多样性、种间亲缘关系AFLP实验奠定基础。 1 材