乳酸菌超氧化物歧化酶基因的克隆与特性分析（临床医学资料）.doc

乳酸菌超氧化物歧化酶基因的克隆与特性分析（临床医学资料） 文档信息 属性： F-01NS7K，doc格式，正文20222字。质优实惠，欢迎下载！ 适用： 作为医学资料、临床医学资料写作的参考文献，解决如何写好实用应用文、正确编写文案格式、内容摘取等相关工作。 目录 TOC \o 1-9 \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：乳酸菌超氧化物歧化酶基因的克隆与特性分析 2 1 材料与方法 3 2 结果 5 3 讨论 6 文2：肝素酶基因的克隆表达研究 7 1 材料与方法 8 2 结果与分析 9 3 结论 10 参考文摘引言： 10 原创性声明（模板） 11 文章致谢（模板） 12 正文 乳酸菌超氧化物歧化酶基因的克隆与特性分析（临床医学资料） 文1：乳酸菌超氧化物歧化酶基因的克隆与特性分析 [ABSTRACT] Objective: To clone and make characteristic analysis of superoxide dismutase (SOD) in lactic acid bacteria. Methods: Based on reported genetic sequence of SOD in lactic acid bacteria, obtained base sequence of SOD by PCR. Ierted product of PCR into cloning vector pMD18T, and made enzyme digestion of recombinant plasmid. Implemented PCR identification and sequencing, and made bioinformatics analysis of sequence. Results: SOD gene was successfully cloned. Sequence analysis indicated the gene was 621 bp, encoding 206 amino acid residues, with the protein molecular weight as 23 KD and isoelectric point as . Conclusion: The main sequence of protein animo acid is alpha helix. [KEY WORDS] Lactic acid; Superoxide dismutase; Gene cloning 超氧化物歧化酶(简称SOD)是一种十分重要的生物体防止氧化损伤的酶类，是生物化内超氧化物阴离子的清除剂，它能使有氧代谢产物：O2歧化为O2和H2O2,从而清除O2对生物体的毒性。自1969年首次被McCord和Fridovich从牛血红细胞中发现和分离提取以来[1]，由于SOD在抗氧化、抗肿瘤、抗衰老以及对抗细胞细胞凋亡[25]等方面起着重要作用，在医药、食品、保健品、化妆品等行业中具有广阔的应用前景。目前SOD大多是从天然动植物中提取，但是，提取法由于天然原料含量极微、提取工艺复杂等原因导致制品纯度低，产量少。为解决来源的限制问题，寻找比较 经济 的途径是必要的。利用微生物特别是基因工程微生物制取SOD的研究日益受到关注[6,7] 乳酸菌是一类重要的 工业 微生物，乳酸菌不仅可以提高食品的营养价值，改善食品风味，增加食品保藏期和附加值，而且具有特殊生理活性和营养功能。乳酸菌能够调节机体胃肠道正常菌群、保持微生态平衡，具有降低血清胆固醇、抗肿瘤、抗衰老和免疫赋活作用[8,9]。研究证实，乳酸菌具有不同的抗氧化活性，乳酸菌的无细胞提取物具有清除机体羟自由基、过氧化氢的能力[10,11]。虽然乳酸菌的抗氧化活性已得到了证实，但它在体内的作用机制还不是很清楚，关于它的作用机制和抗氧化活性有关的物质需要进一步的研究。关于乳酸菌抗氧化性的研究越来越多地受到食品 科学 、预防医学等许多学科学者的广泛重视。本研究中，乳酸菌SOD基因的克隆及生物信息学分析将为乳酸菌抗氧化性的进一步研究及用基因工程方法大批量生产SOD奠定基础。 1 材料与方法 材料 菌株与质粒 乳酸乳球菌购买于广东省微生物研究所菌种保藏中心;大肠杆菌DH5α由本室保存;pMD18T购买于北京天根生化科技有限公司。 试剂材料 细菌培养试剂购于Sigma公司; LA DNA聚合酶、T4连接酶购自大连宝生物公司;细菌基因组提取试剂盒、DNA胶回收试剂盒、小量质粒提取试剂盒、DNA Ladder购自北京天根生化科技有限公司。 方法 乳酸乳球菌