进出口果汁中乳酸、柠檬酸、富马酸含量检测方法 高效液相色谱法.docx

前言

进出口果汁中乳酸、柠檬酸、富马酸含量

检测方法高效液相色谱法

5.2pH计。

SN/T2007—2007

6试样制备与保存

取有代表性样品500g,混合均匀，装入洁净容器内，密闭并标明标记，于4℃保存。7测定步骤

7.1试样溶液制备

称取浓缩果汁试样约5g(精确到0.0001g)于50ml,容量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，过0.45gm滤膜后作为样液，供HPLC测定。

7.2测定

7.2.1色谱条件

a)色谱柱：ImertsilODS3柱[25cm×4.6mm(内径),5μm]或与之相当的色谱柱：b)流动相：0.1mol/L磷酸二氢铵溶液，用磷酸调节pH=2.4,过0.45pm滤膜：

c)流速：0.6mL/min;

d)检测波长：210nm;

e)色谱柱温度：40℃;

f)进样体积：10pl.

7.2.2色谱测定

根据样液中被测物含量情况.选定波度相近的标准工作溶液，对标准工作溶液与样液等体积参插进样测定，标准工作溶液和待测样液乳酸、柠檬酸、富马酸的响应值均应在仪器检测的线性范围内。在上述色谱条件下，乳酸、柠檬酸和富马酸的保留时间分别约为9.0min,11.8min,13.6min。标准品的色谐图参见附录B中图B.1。

7.3空白实验

除不加样品外，按上述相同条件和步骤进行。

7.4结果计算和表述

用色谱数据处理机或按式(1)计算试样中被测物的含量，计算结果须扣除空白值。

(1)

式中：

X——试样中被测物的含量，单位为毫克每千克(mg/kg);

A——样液中被测物的色谱峰面积：

cs——标准工作液中被测物的浓度，单位为微克每毫升(pg/mL.);

V——样液最终定容体积，单位为毫升(mL);

As——标准工作液被测物的色谱峰面积；

m——最终样液所代表的试样量，单位为克(g)。

在规定的可溶性固形物为B时的被测物的含量按式(2)计算。

(2)

式中：

x——可溶性固形物为B时的被测物的含量，单位为毫克每千克(mg/kg);

B——规定的可溶性固形物含量，Brix;

X—试样中被测物的含量，单位为毫克每千克(mg/kg);

B,—试样的可溶性固形物含量，Brix。

SN/T2007—2007

8测定低限、回收率

8.1测定低限

本方法对乳酸、柠檬酸和富马酸的测定低限分别为0.25g/kg,0.25g/kg和2.5mg/kg。

8.2回收率

在浓缩苹果汁和浓缩梨汁中乳酸、柠檬酸和富马酸的添加浓度及其回收率实验数据见表1。

表1样品的添加浓度及实验数据

有机酸

举加浓度

回收率范围/%

乳酸

0.25g/kg

93,0~105.0

0.5g/kg

96.5~103.9

5.0g/kg

98.7~101.8

柠檬酸

0.23g/kg

91.4-104,

0.5g/kg

92.6-102.3

5.0g/he

97.9~101.5

富马酸

2.Sma/ka

18-104,

5.0mg/kg

96,8~102.4

50mg/kg

96.6~102.3

SN/T2007—2007

附录A

(规范性附录)

乳酸标准储备溶液的制备和标定

A.1试剂和材料

A.1.1乳酸：纯度约为90%。

A.1.20.1mol/L.氢氧化钠标准滴定溶液：按GB/T601配制和标定。

A.2仪器和设备

A.2.1电热套：500ml.。

A.2.2圆底烧瓶：500mL。

A.2.3球形冷凝管：400mm。

A.3制备和标定

称取乳酸约3.0g于500mL圆底烧瓶中，加270ml.水，装上球形冷凝管，接通冷却水，加热回流15h.冷却至室温后，移取20mL溶液，用0.1mol/L.氢氧化钠标准滴定溶液按GB/T12456规定的方法标定。乳酸标准储备溶液的浓度按式(A.1)计算。

(A.1)………………

(A.1)

式中：

cg—乳酸标准储备溶液的浓度，单位为微克每毫升(pg/mL);

——氢氧化钠标准滴定溶液的浓度，单位为摩尔每升(mol/L);

V?——滴定乳酸溶液所消耗的氢氧化钠标准滴定溶液的体积，单位为毫升(mL);K——换算系数，在此为0.090;

V?——乳酸溶液的体积，单位为毫升(mL);

92.08——乳酸的摩尔质量。

此标准储备溶液在M℃下可保存3个月。

SN/T2007—2007

附录B

(资料性附录)

标准品的色谱图

1——乳酸：

2——柠稼酸：

3—-富马酸。

图B.1乳酸、柠檬酸、富马酸混合标准品的液相色谱图

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