急性毒性及其评价方法.ppt

急性毒性替代试验固定剂量法上－下移动法第30页,共33页，2024年2月25日，星期天四、急性毒性分级和评价第31页,共33页，2024年2月25日，星期天第32页,共33页，2024年2月25日，星期天感谢大家观看第33页,共33页，2024年2月25日，星期天关于急性毒性及其评价方法一、急性毒性的概念急性毒性：是指机体(人或实验动物)一次或24小时内多次接触外源化学物后在短期内所产生的毒性效应。包括外观改变、大体形态变化、行为方式及死亡效应，最主要观察指标是LD50第2页,共33页，2024年2月25日，星期天?实验动物接触化学物的方式或途径不同，“一次”的含义也有所不同经口和注射接触，“一次”是指在瞬间将受试化学物输入实验动物体内经呼吸道吸入与经皮肤接触，“一次”是指在一个特定的期间内实验动物持续地接触受试化学物的过程第3页,共33页，2024年2月25日，星期天二、急性毒性试验的目的1.测试和求出受试化学物的致死剂量(通常以LD50为主要参数)，并对该外源化学物进行急性毒性分级2.通过观察动物中毒作用表现、毒作用强度和死亡情况，初步评价毒物对机体的毒效应特征、靶器官、剂量－反应关系和对人体产生损害的危险性第4页,共33页，2024年2月25日，星期天3.为亚慢性及慢性毒性试验研究以及其他毒理试验提供接触剂量和观察指标选择的依据4.为毒作用机理研究提供线索，了解中毒效应的特征（包括症状，生理、生化与组织病理损伤）5.研究化学物急性中毒诊断、预防和急救治疗措施第5页,共33页，2024年2月25日，星期天三、急性毒性试验方法的要点(一)实验动物选择选择实验动物的原则：尽量选择急性毒性反应与人近似的动物易于饲养，试验动物操作方便繁殖生育力较强，数量较大能够保障供应价格较低，易于获得动物常用实验动物为大白鼠和小白鼠第6页,共33页，2024年2月25日，星期天第7页,共33页，2024年2月25日，星期天性别?急性毒性试验所用的动物应当是雌、雄各半?如果在研究中发现待测化学物对雌、雄动物的毒性大小有明显差异时，应分别求出雌性与雄性动物各自的LD50值?如果试验是为致畸试验作剂量准备，也可仅做雌性动物的LD50试验第8页,共33页，2024年2月25日，星期天实验动物分组和数量?在利用不同的方法测定化学物LD50时，实验设计中对动物数的要求不同?霍恩氏法测LD50时要求有4个剂量组，每组4或5只动物?改进寇氏法、概率单位法、Bliss法测定则要求5－7个剂量组，每组10只动物或10只以上?对于不同的化学物测定应根据其相应的试验规程确定实验动物数量第9页,共33页，2024年2月25日，星期天动物分组的原则：均衡性和随机性均衡性：要求各组动物的平均体重及体重的离散度尽可能一致。具体来说是：（1）实验动物的体重不应超过全体实验动物平均体重的10％---控制离散度（2）每组之间的平均体重相差不应超过5％---控制均衡性随机性：每只动物分散到各组去的机会是均等的，以避免成见或系统误差第10页,共33页，2024年2月25日，星期天实验动物的预处理适应性饲养一周，选择生理健康的动物凡经口染毒时，要求试验前要对动物禁食，以保证胃内无食物，减少食物对化学物毒性的干扰大鼠、小鼠——隔夜进食；染毒后禁食4h大动物——每日上午喂食前染毒染毒后继续禁食2~4h，但在禁食时要保障饮水第11页,共33页，2024年2月25日，星期天(二)受试物及处理受试物的接受、分样、保管、称重、配制以及在此过程中严格的质量保证影响急性毒性试验受试物剂型：水溶液、混悬液、油溶液第12页,共33页，2024年2月25日，星期天(三)染毒方法1.经口(胃肠道)染毒：（1）灌胃：?空腹?灌胃后2-3h复食?灌胃的体积不超过体重的1-2％：小鼠为0.2－1.0ml/只或0.1－0.5ml/10g较合适大鼠为5ml/只(通常用0.5－1.0ml/100g）家兔为10ml/2kg体重，狗不超过50ml/10kg第13页,共33页，2024年2月25日，星期天灌胃器具制作取l2号普通注射针头，首先将针头尖部去掉，然后用细锉刀把去掉部分锉平、锉光，再用沙纸磨光滑，有条件时可在针尖处点焊成球型。加工成有20度弧度的灌胃针，连