微生物的分离纯化及转接.ppt

食品微生物检验微生物的分离纯化技术

知识目标1.熟悉微生物接种的概念、原理和方法。2.熟悉微生物分离纯化的概念、原理和方法。素质目标技能目标1.树立食品安全社会责任感2.强化遵纪守法的法治意识3.培养严谨细致、精益求精的工匠精神4.培养团结协作，爱岗敬业职业精神5.培养规划思维和精益思维1.认识接种所需要的工具2.掌握常用的接种方法和步骤3.掌握常用的分离纯化的方法和步骤教学目标

分离培养幽门螺旋菌Marshall和Warren做过好多次培养和分离的试验，为了证明自己的发现，马歇尔在1984年吞服了含大量幽门螺杆菌的培养液，10天后，他在胃镜检查时发现，自己的胃黏膜上果然长满了这种“弯曲的细菌”，直到服药治疗后，炎症的症状才消失。正是这种“吃细菌”的“疯狂举动”，让人们逐渐意识到，幽门螺杆菌才是慢性活动性胃炎和消化性溃疡的重要病因。培养学生严谨治学、勇于奉献、追求真理、敢于质疑的科学精神。

实验材料准备1.菌种细菌、酵母菌、放线菌与霉菌混合菌种2.培养基营养琼脂三角瓶固体培养基、察氏固体培养基、麦芽汁固体培养基、高氏一号固体培养基3.药品：9mL无菌生理盐水4.仪器与用具无菌吸管、试管、培养皿、无菌生理盐水、酒精灯、接种环、涂布棒等

用得最多的接种工具是接种环，接种针、涂布棒、移液枪、移液管移液管常用接种工具

接种定义：将微生物的纯种或含有微生物的材料(如水、食品、空气、土壤等)转移到适合其生长繁殖的培养基上或将其植入活的生物体内的过程。微生物的接种

常用的接种方法划线接种、涂布接种、倾注接种、穿刺接种、三点接种、液体接种、活体接种、注射接种等微生物的接种

1.划线接种法：分为平板划线法和斜面划线法①平板划线法：使混合的细菌呈单个分散成长，形成单个菌落，以便获得纯菌、活菌计数。分区划线法：适用于含菌量较多的标本适应于含菌量较少的标本微生物的接种

②斜面划线接种法：主要用于移种纯菌，使其增殖后用于鉴定或保存菌种。微生物的接种

2.涂布接种法：先倒好平板，让其凝固，然后用移液管或移液枪将纯菌或含菌材料(固形物或液体)的菌液倒入培养基表面，迅速用灭菌的涂布棒在表面做来回左右的涂布，使菌液均匀地分布，就可长出单个的微生物菌落，该法可以用于菌落计数或菌种分离。微生物的接种

3.倾注接种法：该法与涂布接种法略有不同，先将待接的微生物先放入培养皿中，然后倒入冷却至45℃左右的固体培养基，迅速轻轻摇匀，这样菌液就达到稀释的目的。微生物的接种

4.穿刺接种法：用接种针从菌种斜面上挑取少量菌体并把它穿刺到固体或半固体的深层培养基中的接种方法。穿刺接种及穿刺后生长形态微生物的接种

5.三点接种法：将少量的微生物接种在平板表面上呈等腰三角形的三点，经培养各自形成菌落后，观察、研究他们的形态特征。微生物的接种

6.液体接种法：从固体培养基中将菌洗下，倒入液体培养基中，或者从液体培养基中，用移液管将菌液接至固体培养基中，都可成为液体培养基。微生物的接种

7.活体接种法：该法主要用于培养病毒或其它病原微生物的一种方法，因为病毒必须接种于在活的生物体内才能生长繁殖。微生物的接种

8.注射接种：用注射的方法将待接的微生物接种于活的生物体内（如人或其它动物）。疫苗预防接种，就是用注射接种，接入人体，来预防某些疾病。微生物的接种

操作要点（1）接种工具需要在火焰上灼烧整个金属部分，应达到烧红为止。（2）接种工具接触接种物之前，应确保接种工具已经冷却。（3）根据实验目的的需求，选择合适的接种方式（4）严格按照无菌操作步骤，进行接种，注意不要用手或其它物品接触试管塞底部、试管口及培养皿内壁，防止污染。（5）接种前，需要检查培养基是否被污染（有杂菌生成），选取无被污染的干燥的培养基作为接种培养基，对要接种的培养基进行标记，注明菌名、接种日期、接种人。微生物的接种

培养：将已经接种的培养基放置在一定的温度、湿度、氧气浓度下，经过一定的时间，使其中的微生物菌种得以生长和繁殖，这一过程就是培养。微生物的接种

分类根据培养基的物理状态选择培养条件和方式分为：液体培养和固体培养。根据需氧情况选择培养条件和方式分为：好氧培养、微需氧培养和厌氧培养。微生物的培养

1.液体培养：在实验中，通过液体培养可以使微生物迅速增殖，获得大量的培养物，在一定条件下，也是微生物选择增菌的有效方法。微生物的接种

2.固体培养：通常分为斜面培养和平板培养。固体培养是将菌种接种至疏松而富有营养的固体培养基中，在合适的条件下进行微生物培养的方法。微生物的培养

思考：为什么要将平板倒置培养？

3.好氧培养：也称“好气培养”。这种微生物在培养时，需要有氧气加入，否则就不能生长良好。4.微需氧培养：需要微量的氧气。5.厌氧培养：也叫“厌气培养”。该类微生物在培养过程中，这类微生物在培养时，不需要氧气参加。微生物