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紫外-可见光谱仪操作使用介
绍
基本知识
w电磁辐射与紫外光谱
光是一种电磁辐射，从波长极短的宇宙射线至波长
很长的无线电构成一个连续光谱。
部分电磁辐射范围
远紫外100~200nm
近紫外200~400nm
可见光400~800nm
近红外800~2500nm
远红外2500~3500nm
紫外光谱由分子外层电子在不同能级间
跃迁产生。紫外-可见光谱仪操作使用介绍
w朗伯—比尔定律(Lambert-beer)
A=吸光度I=入射光强度
0
I=入射光通过样品后的透射强度
-1.-1
ε＝摩尔吸光度（cmm）
C=摩尔浓度(mol)l=光程(cm)
紫外-可见光谱仪操作使用介绍
当产生紫外吸收的物质为未知物时，其吸收强
度可用表示:
A=吸光度
c为100ml溶剂中溶质的克数
l=光程(cm)
紫外-可见光谱仪操作使用介绍
选取溶剂需注意下列几点：
1)当光的波长减小到一定数值时，溶剂会对它产
生强烈的吸收(即溶剂不透明)，这即是所谓“端吸收”，
样品的吸收带应处于溶剂的透明范围。透明范围的
最短波长称透明界限。
2)样品在溶剂中能达到必要的浓度(此浓度值决定
于样品摩尔吸收系数的大小)。
3)要考虑溶质和溶剂分子之间的作用力。一般溶
剂分子的极性强则与溶质分子的作用强。因此应尽
量采用低极性溶剂。
4)为与文献对比，宜采用文献中所使用的溶剂。
5)其它如溶剂的挥发性、稳定性、精制的再现性等。
紫外-可见光谱仪操作使用介绍
紫外-可见光谱仪操作使用介绍
基本原理
w电子跃迁产生紫外－可见吸收光谱
分子的总能量是其键能(电子能)、振动能和转动能
的总和，当分子从辐射的电磁波吸收能量之后，分
子会从低能级跃迁到较高的能级。吸收频率决定于
分子的能级差，其计算式为：
∆E=hυ或∆E=hC/λ
式中∆E为分于跃迁前后能级差；
υ、λ分别为所吸收的电磁波的频率及波长
C为光速；
h为普朗克常数。
紫外-可见光谱仪操作使用介绍
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分子的电子状态能约为8.38×10~8.38×10
5
(J/mol)(4.19×10相当于286nm处发生紫外吸收)
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