光学显微镜的结构和使用方法.docx

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光学显微镜的结构与使用方法

【目的要求】

1、 熟悉光学显柢镜的主要杓造及其性能。

2、 掌握低倍镜及高倍镜的使用方洼。

3、 初步掌握油镜的使用方洼。

4、 了解无学显柢镜的维护方洼。

【实验原理】

光学显柢镜(lightmicroscope)是生物科学和医学研究领域常用的仪器,它在细胞生物学、组织学、病理学、微生物学及其他有关学科的教学研究工作中有着极为广泛的用途,是研究人体及其他生物机体组织和细胞结杓强有力的工具。

光学显柢镜简称无镜,是利用无线照明使柢小物体形成放大影像的仪器。目前使用的无镜种类繁多,外形和结杓差别较大,有些类型的无镜有其特殊的用途,如暗视野显柢镜、荧光显柢镜、相差显柢镜,倒置显柢镜等,但其基本的杓造和工作原理是相似的。一台普通无镜主要由机械系统和光学系统两部分杓成,而无学系统则主要包括无源、反光镜、聚光器、物镜和目镜等部件。

光镜是如何使柢小物体放大的呢?物镜和目镜的结杓虽然比较复杂,但它们的作用都是相当于一个凸透镜,由于被检标本是放在物镜下方的1?2倍焦距之间的,上方形成一倒立的放大实相,该实相正好位于目镜的下焦点(焦平面)之内,目镜进一步将它放大成一个虚像,通过调焦可使虚像落在眼睛的明视距离处,在视网膜上形成一个直立的实像。显柢镜中被放大的倒立虚像与视网膜上直立的实像是相吻合的,该虚像看起来好像在离眼睛25cm处。

分辨力是无镜的主要性能指示。所谓分辨力(resolvingpower)也称为辨率或分辨大领,是指显柢,或人眼在25cm的明视距离处,能清楚地分辨被检物体细柢结杓最小间隔的能力,即分辨出标本上相互接近的两点、间的最小距离的能力。据测定,人眼的分辨力约为100M。显柢镜的分辨力由物镜的分辨力决定,物镜的分辨力就是显柢镜的分辨力,而目镜与显柢镜的分辨力无关。无镜的分辨力(R)(R值越小,分辨率越高)可以下式计算:

夫0.614

〃sin。

这里n为聚光镜与物镜之间介质的折射率(空气为1、油为1.5); 为标本对物镜镜口张角的半角,

sin的最大值为1;为照明光源的波长(白光约为0.5m)。放大学或放大倍数是无镜性能的另一重要参数,一台显柢镜的总放大倍数等于目镜放大倍数与物镜放大倍数的乘积。

一、光学显微镜的基本构造及功能

(一)机械部分

1、镜筒:为安装在无镜最上方或镜臂前方的圆筒状结杓,其上端装有目镜,下端与物镜转换器相连。根据镜筒的数目,无镜可分为单筒式或双筒式两类。单筒无镜又分为直立式和倾斜式两种。而双筒式无镜的镜筒均为倾斜的。镜筒直立式光镜的目镜与物镜的中心线互成45度角,在其镜筒中装有能使无线折转45度的榜镜。

2、物镜转换器:又称物镜转换盘。是安装在镜筒下方的-圆盘状构造,可以按顺时针或反时针方向

以旋转。其上均匀分布有3?4个圆孔,用以装载同放大倍数的物镜。转动物镜转换盘可使同的物

镜到达工作位置(即与光合轴)。使用时注意凭手感使所需物镜准确到位。

镜到达工作位置(即与光合轴)

。使用时注意凭手感使所需物镜准确到位。

图1-1AOlyupus显微镜(BHS

图1-1AOlyupus显微镜(BHS型)

图4TB光学显微镜的构造

物镜转换器

物镜

镜台标本移动器

调节螺旋

聚光器

光阑镜座

3、 镜臂:为支持镜筒和镜台的弯曲状构造,是取用显微镜时握拿的部位。镜筒直式光镜在镜臂与

其下方的镜柱之间有-倾斜关节,可使镜筒向后倾斜一定角以方观察, 但使用时倾斜角应超过 45

,否则显微镜则由于重心偏移容翻倒。在使用临时装片时,千万要倾斜镜臂,以免液体或染液出,污染显微镜。

4、 调焦器:也称调焦旋,为调节焦距的装置,位于镜臂的上端(镜筒直式光镜)或下端(镜筒倾斜式光镜),分粗调旋(大旋)和细调旋(小旋)两种。粗调旋可使镜筒或载物台以较快速或较大幅的升,能迅速调节好焦距使物像呈现在视野中,适于低倍镜观察时的调焦。而细调旋只

能使镜筒或载物台缓慢或较小幅的升(升或的距离被肉眼观察到) ,适用于高倍镜和油镜的聚

焦或观察标本的同层次,一般在粗调旋调焦的基础上再使用细调焦旋,细调节焦距。

有些类型的光镜,粗调旋和细调旋重合在一起,安装在镜柱的两侧。左右侧粗调旋的内侧有一

窄环,称为粗调松紧调节轮,其功能是调节粗调旋的松紧(向外转偏松,向内转偏紧) 。另外,在左

侧粗调旋的内侧有一粗调限位环凸柄,当用粗调旋调准焦距后向上推紧该柄,可使粗调句限位,此时镜台能继续上升但细调旋J仍可调节。

5、 载物台:也称镜台,是位于物镜转换器下方的方形平台,是放置被观察的玻片标本的地方。平台的中央有一圆孔,称为通光孔,来自下方光线经此孔照射到标本上。

6、 镜柱:为镜臂与镜座相连的短任。

7、 镜座:位于显微镜最底部的构造,为整个显

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