人教版（2019）高考生物选择性必修3《基因工程》知识点提纲填空练习版（Word版，含答案）.docx

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人教版（2019）高考生物选择性必修3《基因工程》知识点提纲填空练习版

一基因工程的概念及基本工具

1．基因工程概念

基因工程的别名

基因拼接技术或______________

操作环境

生物体外

操作对象

__________

操作原理

__________

操作水平

______________

基本过程

剪切→拼接→导入→表达

目的

创造出更符合人们需要的___________________

优点

克服远缘杂交不亲和障碍，_________生物的遗传性状

2．DNA重组技术的基本工具

(1)限制性内切核酸酶(简称：________)

①本质：蛋白质。

②来源：主要是从_____生物中分离纯化出来的。

③作用：识别双链DNA分子的某种特定的_________，并且使每一条链中特定部位的_________断开。

④结果：产生_________或________。

例：如下图所示，EcoRⅠ限制酶识别的碱基序列是___________，切割位点在______之间；SmaⅠ限制酶识别的碱基序列是___________，切割位点在______之间；说明限制酶具有_______。

(2)DNA连接酶

①作用：将限制酶切割下来的DNA片段________________。

②类型

常用类型

E.coliDNA连接酶

T4DNA连接酶

来源

_________

T4噬菌体

功能

只“缝合”_________

“缝合”________________

结果

恢复被限制酶切开的___________

③DNA连接酶和限制酶的关系

(3)载体

①载体的作用：携带外源DNA片段进入受体细胞。

②常用载体：_____。其他载体：噬菌体、___________等。

③质粒

a．概念：质粒是一种裸露的、结构简单、独立于真核细胞细胞核或原核细胞_____DNA之外，并具有自我复制能力的环状____________。

b．特点：能自我复制，或整合到受体DNA上，随受体DNA复制；有一个至多个___________；用作载体的质粒都经过人工改造；有特殊_________，便于重组DNA的筛选。

3．实验：DNA的粗提取与鉴定

(1)提取DNA的原理

DNA不溶于_____，但某些蛋白质溶于_____，利用这一原理，可以初步分离DNA与蛋白质。DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同，它能溶于________的NaCl溶液。

(2)鉴定DNA的原理

在_________下，DNA遇_______试剂会呈现蓝色，因此_______试剂可以作为鉴定DNA的试剂。

(3)实验步骤(以洋葱为例)

制取洋葱研磨液→过滤或离心，取上清液→加入预冷的体积分数为95%的酒精，获得沉淀物→溶于2mol/L的NaCl溶液中，用二苯胺试剂鉴定。

二基因工程的基本操作程序

(一)目的基因的筛选与获取

1．目的基因的筛选：从相关的已知结构和功能清晰的基因中进行筛选是较为有效的方法之一。

2．目的基因的获取

(1)获取方法eq\b\lc\{\rc\(\a\vs4\al\co1(构建基因文库,人工合成,利用PCR技术))

(2)利用PCR获取和扩增目的基因

PCR含义

在体外提供参与DNA复制的各种组分与反应条件，对目的基因的核苷酸序列进行大量复制的技术

PCR原理

DNA___________

要求

模板

______________

原料

4种脱氧核苷酸

酶

耐高温的__________

引物

一小段能与DNA母链的一段碱基序列互补配对的短单链_____

在一定的缓冲溶液中进行；需要控制温度的变化

PCR反应过程

变性

当温度上升到℃以上时，双链DNA解聚为单链

复性

温度下降到℃左右时，两种引物通过____________与两条单链DNA结合

延伸

72℃左右时，____________从引物3′端开始进行互补链的合成

扩增方向

DNA聚合酶不能从头开始合成DNA，而只能从3′端延伸DNA链，即DNA的合成方向总是从子链的_____端向_____端延伸

方式

指数形式扩增(约为2n，n为扩增循环的次数)

结果

______________________

产物鉴定

琼脂糖凝胶电泳

(二)基因表达载体的构建——基因工程的核心工作

1．操作目的

使目的基因在受体细胞中_________，并且可以_____给下一代，同时，使目的基因能够_____和发挥作用。

2．组成

3．构建过程

(三)将目的基因导入受体细胞

1．将目的基因导入植物细胞

(1)花粉管通道法——我国独创的方法

操作方式：可以用微量注射器将含目的基因的DNA溶液直接注入_____中；可以在植物受粉后的一定时间内，剪去