实验二植物基因组DNA的提取课件.pptVIP

实验二植物基因组DNA的提取;背景知识;背景知识;背景知识;背景知识;背景知识;DNA为白色类似石棉样的纤维状物，大都呈酸味。

DNA一般都溶于水，不溶于醇类、氯仿等有机溶剂，在高盐溶液中的溶解度最大。

在酸性溶液中易水解，中性或弱碱性溶液中较稳定。;取20ml前面配制的氯仿-异戊醇+20mlTris饱和酚

取20ml前面配制的氯仿-异戊醇+20mlTris饱和酚

取20ml前面配制的氯仿-异戊醇+20mlTris饱和酚

1%β-巯基乙醇2ml

取20ml前面配制的氯仿-异戊醇+20mlTris饱和酚

1ml酚-氯仿-异戊醇

蒸馏水100ml

蒸馏水100ml

十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)、三羟甲基氨基甲烷(Tris)、乙二胺四乙酸二钠(EDTA-2Na)、氯化钠、Tris饱和酚、异丙醇、β-巯基乙醇、无水乙醇、氯仿、异戊醇、液氮、聚乙烯吡咯烷酮(PVP-40)

1ml酚-氯仿-异戊醇

5mol/lEDTA8ml

1ml酚-氯仿-异戊醇

酚:氯仿:异戊醇=25:24:140ml

1ml酚-氯仿-异戊醇

取20ml前面配制的氯仿-异戊醇+20mlTris饱和酚

DNA为白色类似石棉样的纤维状物，大都呈酸味。

蒸馏水100ml

抽提时不要有太力振动，操作也要仔细，尽量避免DNA断裂。

取20ml前面配制的氯仿-异戊醇+20mlTris饱和酚;实验原理;新鲜菠菜叶片

十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)、三羟甲基氨基甲烷(Tris)、乙二胺四乙酸二钠(EDTA-2Na)、氯化钠、Tris饱和酚、异丙醇、β-巯基乙醇、无水乙醇、氯仿、异戊醇、液氮、聚乙烯吡咯烷酮(PVP-40);10mmolTris-HCl(PH8.

过尖的枪头会把DNA链弄断。

取20ml前面配制的氯仿-异戊醇+20mlTris饱和酚

氯仿:异戊醇=24:1100ml

抽提时不要有太力振动，操作也要仔细，尽量避免DNA断裂。

部分药品有毒，操作中应注意安全防护；

取20ml前面配制的氯仿-异戊醇+20mlTris饱和酚

1ml酚-氯仿-异戊醇

1ml酚-氯仿-异戊醇

1%β-巯基乙醇2ml

5mol/lEDTA8ml

蒸馏水100ml

5mol/lEDTA8ml

5mol/lEDTA(PH8.

部分药品有毒，操作中应注意安全防护；

10000r/min

蒸馏水100ml

刚投入水浴时可以稍快速的晃动，之后的晃动一定要轻柔！

CTAB4g

取20ml前面配制的氯仿-异戊醇+20mlTris饱和酚

蒸馏水100ml

十六烷基三甲基溴化铵(CTAB)、三羟甲基氨基甲烷(Tris)、乙二胺四乙酸二钠(EDTA-2Na)、氯化钠、Tris饱和酚、异丙醇、β-巯基乙醇、无水乙醇、氯仿、异戊醇、液氮、聚乙烯吡咯烷酮(PVP-40);实验试剂;2.破碎细胞，释放溶解核酸;3.抽提去除蛋白质;4.沉淀核酸;在整个实验过程中应严格执行无菌操作；

部分药品有毒，操作中应注意安全防护；

磨样时最好是加液氮，磨样速度要快，使材料处于低温状态。

刚投入水浴时可以稍快速的晃动，之后的晃动一定要轻柔！

抽提时不要有太力振动，操作也要仔细，尽量避免DNA断裂。

将DNA加入异丙醇时用的枪头一定要剪过的。这点很重要。过尖的枪头会把DNA链弄断。??

;;蒸馏水100ml

酚:氯仿:异戊醇=25:24:140ml

取20ml前面配制的氯仿-异戊醇+20mlTris饱和酚

取20ml前面配制的氯仿-异戊醇+20mlTris饱和酚

植物细胞中有哪些细胞器中含有DNA？

10000r/min

蒸馏水100ml

1%β-巯基乙醇2ml

CTAB4g

将DNA加入异丙醇时用的枪头一定要剪过的。

破碎细胞，释放溶解核酸

在酸性溶液中易水解，中性或弱碱性溶液中较稳定。

蒸馏水100ml

1%β-巯基乙醇2ml

过尖的枪头会把DNA链弄断。

1ml酚-氯仿-异戊醇

CTAB4g

1ml酚-氯仿-异戊醇

注意：此方法会把少量RNA提取出来，故后面通称核酸的提取。

酚:氯仿:异戊醇=25:24:140ml

蒸馏水100ml

在整个实验过程中应严格执行无菌操作；