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常用培养基
LB培养基
将以下组分溶解在0.9L水中:
蛋白胨10g
酵母提取物5g
氯化钠10g
如果需要用1NNaOH〔~1ml〕调整pH至7.0,再补足水至1L。注:琼脂平板需添加琼脂
粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。
SOB培养基
将以下组分溶解在0.9L水中:
蛋白胨20g
酵母提取物5g
氯化钠0.5g
1mol/L氯化钾2.5ml
用水补足体积到1L。分成100ml的小份,高压灭菌。培养基冷却到室温后,再在每100ml
的小份中加1ml灭过菌的1mol/L氯化镁。
SOC培养基
成分、方法同SOB培养基的配制,只是在培养基冷却到室温后,除了在每100ml的小份中
加1ml灭过菌的1mol/L氯化镁外,再加2ml灭菌的1mol/L葡萄糖〔18g葡萄糖溶于足够水
中,再用水补足到100ml,用0.22um的滤膜过滤除菌〕。
TB培养基
将以下组分溶解在0.9L水中:
蛋白胨12g
酵母提取物24g
甘油4ml
.z.
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各组分溶解后高压灭菌。冷却到60℃,再加100ml灭菌的170mmol/LKH2PO4/0.72mol/L
K2HPO4的溶液〔2.31g的KH2PO4和12.54gK2HPO4溶在足量的水中,使终体积为100ml。
高压灭菌或用0.22um的滤膜过滤除菌〕。
2×YT培养基
将以下组分溶解在0.9L水中:
蛋白胨16g
酵母提取物10g
氯化钠4ml
如果需要用1NNaOH〔~1ml〕调整pH至7.0,再补足水至1L。注:琼脂平板需添加琼脂
粉12g/L,上层琼脂平板添加琼脂粉7g/L。
YPD培养基
将以下组分溶解在0.9L水中:
蛋白胨20g
酵母提取物10g
葡萄糖20g
用水补足体积为1L后,高压灭菌。建议在高压灭菌之前,对色氨酸营养缺陷型每升培养基
添加1.6g色氨酸,因为YPD培养基是色氨酸限制型培养基。为了配制平板,需要在高压灭
菌前参加20g琼脂粉。
常用抗生素
氨苄青霉素〔ampicillin〕〔100mg/ml〕溶解1g氨苄青霉素钠盐于足量的水中,最后定容
至10ml。分装成小份于-20℃贮存。常以25ug/ml~50ug/ml的终浓度添加于生长培养
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