DB42T 1992-2023动物尿液中α-受体激动剂的测定 高效液相色谱-串联质谱法.pdfVIP

动物尿液中α-受体激动剂的测定

高效液相色谱-串联质谱法

1范围

本文件规定了动物尿液中可乐定、溴莫尼定、替扎尼定、胍法辛、胍那苄、安普乐定、赛拉嗪等7

种α-受体激动剂的液相色谱-串联质谱测定方法。

本文件适用于猪、牛、羊的尿液中可乐定、溴莫尼定、替扎尼定、胍法辛、胍那苄、安普乐定、赛

拉嗪等7种α-受体激动剂的测定。

2规范性引用文件

下列文件中的内容通过文中的规范性引用而构成本文件必不可少的条款。其中，注日期的引用文件，

仅该日期对应的版本适用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本

文件。

GB/T6682分析实验室用水规格和试验方法

3术语和定义

本文件没有需要界定的术语和定义。

4原理

试样中残留的α-受体激动剂，经过氢氧化钠溶液碱化，乙酸乙酯提取并浓缩后用混合型阳离子固相

萃取小柱净化，液相色谱-串联质谱测定，外标法定量。

5试剂和材料

测定试剂和材料如下：

——水为符合GB/T6682规定的一级水；

——甲醇（CHOH）：色谱纯；

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——甲酸(HCOOH)：色谱纯；

——氢氧化钠（NaOH）：分析纯；

——乙酸乙酯（CHCOOCH）：分析纯；

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——氯化钠（NaCl）：分析纯；

——氨水(NHOH)：25%～28%，分析纯；

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——氢氧化钠溶液（5mol/L）：准确称取固体氢氧化钠100g，用水溶解并定容至500mL；

——5%氨水甲醇溶液：取5mL氨水，用甲醇定容至100mL；

——0.1%甲酸溶液：取甲酸0.1mL，用水定容至100mL；

——甲酸-甲醇溶液：取0.1%甲酸溶液90mL，加甲醇10mL，混匀；

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——标准物质：盐酸可乐定、溴莫尼定、盐酸替扎尼定、胍法辛、胍那苄、盐酸安普乐定、赛拉

嗪含量均≥98.0%。具体见附录A；

——标准储备液：准确称取适量的标准物质，用甲醇分别配制成1mg/mL标准储备液，于2℃～

8℃温度保存，有效期6个月；

——混合标准中间液：分别准确量取1.00mL可乐定、溴莫尼定、替扎尼定、胍法辛、胍那苄、

安普乐定、赛拉嗪标准储备液置于同一个棕色100mL量瓶中，用甲醇配制成浓度为10

μg/mL的混合标准中间液，于2℃～8℃温度保存，有效期1个月；

——混合型阳离子固相萃取柱：60mg/3mL，或相当者；

——微孔滤头：0.22μm有机相。

6仪器和设备

测定仪器和设备如下：

——液相色谱-串联质谱仪：配电喷雾离子源（ESI）；

——天平：感量0.01g和0.01mg；

——氮吹仪；

——冷冻高速离心机：转速≥10000r/min；

——振荡器；

——涡旋混合器；

——离心管：50mL；

——固相萃取装置；

——pH计。

7样品的制备和保存

样品的制备

取适量新鲜或解冻后摇匀的空白或供试样品，如有混浊，离心后取上清备用。

——取摇匀的供试样品，作为供试试样。

——取摇匀的空白样品，作为空白试样。

——取摇匀的空白样品，添加适宜浓度的标准工作液，作为空白添加试样。

样品的保存

-20℃以下条件保存。

8测定步骤

样品前处理

取试样5.0mL,于50mL塑料离心管中,用5mol/L氢氧化钠溶液调pH值至10.0～11.0，涡旋混匀，加

乙酸乙酯10mL，加1.5g～2.0g氯化钠，充分振荡，于10000r/min离心5min，转移上清液于另一50mL

塑料离心管中。下层溶液中加乙酸乙酯10mL重复提取一次，合并两次上清液，50℃氮气吹干，加甲酸

-甲醇溶液5.0mL溶解残余物，备用。

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取固相萃取柱依次用甲醇3mL、水3mL活化，把全部备用液以每秒一滴的速度过混合型阳离子固相