第三章 DNA复制课件.ppt

第三章DNA复制

(DNAReplication);第一节基本概念;第一节基本概念

(BasicConcept);DNA复制

亲代双链DNA分子在DNA聚合酶的作用下，分别以

各单链DNA分子为模板，聚合与自身碱基可以互补

配对的游离的dNTP,合成出两条与亲代DNA分子完

全相同的子代DNA分子的过程。;5’;质粒一般是一个自主环状的DNA基因组，构成一个独立复制子；

原核生物基因组中一般只含一个复制子，在唯一的起始点启动就会引起整个基因组复制；

真核生物基因组含多个复制子（一般40-100kb/个）。;复制起始点、复制子与复制叉（动画演示）;;DNA复制在细胞周期的S期;第二节复制概况

(SurveysofReplication);一、DNA的半保留复制

（Semi-ConservationReplication）;15N标记实验;二、复制起点、方式和方向;真核生物（Eukaryote）:多复制起点

即－－一个genome中有多个复制单位;;富含AT发夹结构

许多酶的结合位点;复制叉（Replicationfork）：染色体中参与复制的活

性区域，即复制正在发生的位点;;真核生物的多复制子多个复制眼;（1）单双向复制取决于起点处有一个还是两个复制叉;;3、复制方式;单、双向θ复制模式图;第三章-DNA复制;（2）置换式又称D环复制：双螺旋的两条链并不同时进行复制，轻链先开始复制，稍后重链再开始复制，当复制沿轻链开始时，重链上产生了D环，随环形轻链复制的进行，D环增大，重链后亦开始复制，最后两条链完成复制形成两条新的DNA双螺旋。线粒体和叶绿体DNA的复制方式;（3）共价延伸方式(covalence

elongation）或滚环式复制(rollingcirclereplication)

由于复制时产生的滚环结

构形状象σ，又称σ复制

病毒、细菌因子;单林娜制作;第三节DNA复制的酶学

(EnzymologyofDNAReplication);1.拓扑异构酶(topoisomerase);（1）拓扑异构酶I（TopoI）;第三章-DNA复制;原核拓扑构酶Ⅰ作用机制：

①酶与DNA结合使双链解旋；

②使一条链切开，但酶与切口的两端结合阻止了螺??的旋转；

③酶使另一条链经过缺口，然后再将两断端连接起来；

④酶从DNA上脱落，两条链复原，得到的DNA比原来少一个负超螺旋。;第三章-DNA复制;（2）拓扑异构酶Ⅱ（TopoⅡ）;第三章-DNA复制;Replicationmachinery;2.解螺旋酶;3.单链结合蛋白（SSB）

singlestrandbindingprotein;第三章-DNA复制;第三章-DNA复制;4.引物、引发酶;（2）引物酶（primase）

催化RNA引物的合成。

E.coli中称DnaG蛋白，由dnaG编码，对利福平不敏感。;二、DNA聚合反应和聚合酶;三种DNA聚合酶的结构和功能;DNApol?;DNApolⅡ;DNApolⅢ;功能;其中DNApolⅢ全酶有十种共22个亚基;第三章-DNA复制;DNApolⅠ和DNApolⅢ的主要特性和功能;2、3’－5’外切核酸酶活性

校对功能(proofreading);第三章-DNA复制;3、5’－3’外切核酸酶活性

DNApolⅠ的5’－3’外切活性有以下三个特点：

?必须有5’－磷酸末端

?被除去的核苷酸必须是已经配对的

?被除去的可以是脱氧核糖核苷酸，也可以是核糖

核苷酸（切刻平移）;4、子链DNA延伸方向只能是5’－3’;?如果DNA的延伸方