凝胶柱色谱法基础知识课件讲解.ppt

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经典柱色谱技术——凝胶柱色谱法基础知识江苏农牧科技职业学院动物药学院仪器分析技术主要内容凝胶柱色谱法定义12分离原理仪器分析技术4流动相固定相3一、凝胶柱色谱法定义也称空间排阻色谱、分子排阻色谱,是按分子尺寸的差异进行分离的一种液相色谱方法。凝胶色谱柱仪器分析技术二、分离原理

凝胶的孔穴大小与被分离组分大小相当,尺寸大的组分分子可以渗入到凝胶的大孔内,但进不了小孔,甚至于完全被排斥先流出色谱柱。尺寸小的组分分子,大孔小孔都可以渗进去,最后流出。仪器分析技术三、固定相1、无机凝胶(硬质凝胶)——多孔硅胶、多孔玻璃珠性能:化学惰性、稳定性及机械强度均好,耐高温,使用寿命长,但装柱时易碎,不易装紧,柱分离效能较低。2、有机凝胶(半硬质凝胶)——聚苯乙烯凝胶性能:能耐较高压力,适用于有机溶剂作流动相,有一定可压缩性,可填得紧密,柱分离效能较高。但在有机溶剂中有轻度膨胀。3、新型凝胶---葡聚糖凝胶性能:粒度细,机械强度高,分离速度快。仪器分析技术四、流动相1、要求流动相必须与凝胶本身非常相似,能溶解样品,浸润凝胶,且具有较低的黏度,有利于大分子的扩散。2、选用方法水溶性样品——水溶液为流动相非水溶性样品——有机溶剂为流动相3、常用的流动相四氢呋喃、甲苯、N,N-二甲基甲酰胺、三氯甲烷、水等。仪器分析技术谢谢观看!仪器分析技术

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