临床细菌学检验技术.ppt

本章学习目标1、形态学检查（镜检）意义2、G染色法原理、方法、结果、意义和操作注意事项3、培养基概念、成分、分类与用途4、细菌分离方法及其用途5、常用生化反应原理、培养基、结果判定、应用6、细菌的非培养检测方法及其意义（适用于？）普通光学显微镜的分辨率为0.25um。一般细菌都大于0.25um，故可用普通光学显微镜观察。电子显微镜的分辨率为1nm。不仅能看清细菌的外形，内部超微结构可一览无余。常用复染色法A.革兰染色法:细菌常规染色法；染色结果紫（蓝）色为G+菌，红色为G—菌。B.抗酸染色法:常用于结核分枝杆菌等抗酸菌的检查；抗酸菌染成红色其他蓝色。C.特殊染色法:细菌结构如荚膜、芽胞、鞭毛以及细胞壁、异染颗粒等的染色。革兰染色法：结晶紫碘液95%乙醇复红抗酸染色：石炭酸复红3%盐酸酒精碱性美兰其它特殊染色革（格）兰染色法[影响因素]:1.培养基成分;2.培养条件;3.操作技术。操作技术方面指:涂片厚薄、干燥固定、脱色时间(此为关键步骤)[临床意义]鉴别细菌、选择药物参考、与致病性有关课堂检测1、使用普通光学显微镜，采用悬滴法可观察细菌的（）A鞭毛B芽孢C菌毛D动力E荚膜2、格兰染色液中稀释复红的作用是（）A固定B初染C媒染D脱色E复染3、不属于细菌形态学检查范畴的是（）A暗视野显微镜观察细菌动力B光镜观察细菌的排列方式C鞭毛染色观察细菌染色性D格兰染色观察细菌染色性E观察菌落在血板上的溶血性4、.下列属于酸性染料的是（）A美兰B天青C硫堇D伊红E苏木素5、标本采集一般原则叙述错误的是（）A标本采集时间最好是病程早期、急性期或症状典型时B标本可在使用抗菌药物之前或用药后采集C采集的标本应无外源性污染D采集无菌标本时，应严格进行无菌操作E对于正常菌群寄生部位采集的标本，要采用特殊选择性培养基6.革兰氏染色结果判定G+应为（）A红色B紫色C兰色D黄色E白色7、革兰染色所用试剂的顺序是（）A稀释复红→碘液→酒精→结晶紫B结晶紫→酒精→碘液→稀释复红C结晶紫→碘液→酒精→稀释复红D稀释复红→酒精→结晶紫→碘液E稀释复红→结晶紫→碘液→酒精8.细菌形态学检验（直接及染色镜检）的意义错误的是（）A迅速了解标本中有无细菌及大致菌量B根据细菌形态、结构和染色性对病原菌作确诊C镜检可初步识别病原菌，为选择培养基和进一步作生化反应、血清学鉴定提供依据D镜检对临床早期诊断和治疗疾病有参考意义E某些标本中的特定细菌通过形态学检查可得到初步诊断（二）培养基的分类

按其营养组成和用途分类：基础培养基、营养培养基鉴别培养基选择培养基特殊培养基（厌氧、L型细菌培养等）按其物理状态分类：固体培养基液体培养基半固体培养基按其成分分类：合成培养基、天然培养基（三）培养基的选择临床标本常规分离用培养基概念微生物的培养——是指根据微生物的生理特征，用适宜的营养基质和培养条件培养微生物的过程。接种——是指将微生物的纯菌种或含有微生物的材料（水、土、血脓粪尿等标本）转移到培养基上的过程。菌落——由单个细菌在固体培养基上生长繁殖形成的单一的、肉眼可见的细菌集团，称为菌落。（划线分离法，接种的细菌能适当分开，1个菌落为1个活菌繁殖而成，菌落为纯种）增菌培养——病原菌