微生物量碳的测定方法.pdf

氯仿薰蒸浸提法测定土壤微生物生物量碳

一、采样与样品预处理

土壤样品的采集方法和要求与测定其它土壤性质时没有本质区别。采集到的新鲜土壤

样品立即去除植物残体、根系和可见的土壤动物(如蚯蚓)等,然后迅速过筛(2～3mm)，或

放在低温下(2～4℃)保存。如果土壤太湿无法过筛，进行晾干时，必须经常翻动土壤，避

免局部风干导致微生物死亡。过筛的土壤样品调节到田间持水量的50%左右，在室温下于

密闭装置中预培养1周，密闭容器中要放入两个50mL的烧杯，分别加入水和稀NaOH，

以保持其湿度和吸收释放的CO。预培养后的土壤最好立即分析，若需要放置一段时间，

2

在低温下(2～4℃)最好不要超过10d。

土壤田间持水量采用改进的Shaw（1958）方法测定。在漏斗下端连接一带夹子的橡

胶管，漏斗用玻璃纤维堵塞。取50.00g土壤于漏斗中，夹紧橡胶管，加入50ml水，保

持30min，再打开夹子使多余的水流入量筒，30min后测定流出的水量，同时测定土壤

湿度，计算土壤田间持水量，用烘干土壤质量表示。——林启美老师文件内容

二、方法—氯仿薰蒸浸提法（FE）

1、方法原理

土壤经氯仿薰蒸处理，微生物被杀死，细胞破裂后，细胞内容物释放到土壤中，导致

土壤中的可提取的碳大幅度增加。通过测定浸提液中全碳的含量可以计算土壤微生物量碳。

浸提液中碳可用重铬酸钾容量法测定，也可用微量碳分析仪测定。此处介绍比较简单

的重铬酸钾容量方法。

2、仪器及设备

培养箱；真空干燥器；真空泵；往复式振荡机(速率200rev/min)；冰柜；磷酸浴。

3、试剂

1.无乙醇氯仿：量取500mL氯仿于1000mL的分液漏斗中，加入50mL硫酸溶液

[(HSO)=5%]，充分摇匀，弃除上层硫酸溶液，如此进行3次。再加入50mL去离子水，

24

同上摇匀，弃去上部的水分，如此进行5次。得到纯氯仿存放在棕色瓶中，并加入约20g

无水KCO，在冰箱的冷藏室中保存备用。（试剂浓硫酸(HSO)=95~98%，稀释19

2324

倍）

c

2.硫酸钾溶液[(KSO)=0.5molL·]:称取硫酸钾（KSO,化学纯）87.10g，加热

-1

2424

溶于去离子水中，稀释至1L。(需加热溶解)

c

3.重铬酸钾[(1/6KCrO)=0.2000molL·]:称取经130C烘干2～3h的重铬酸钾

-1o

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（KCrO，分析纯）9.8110g，溶于1000mL的去离子水中。

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c

4.重铬酸钾标准溶液：[(1/6KCrO)=0.1000molL·]:称取经130C烘干2～3h

-1o

227

的重铬酸钾（KCrO，分析纯）4.9055g，溶于1000mL的去离子水中。