动物生物化学实验.pptx

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动物生物化学实验;动物生物化学实验;实验一实验室基本知识;;二、实验室常用量器及仪器设备介绍;(2)刻度吸管;;2.常用仪器设备

(1)离心机;离心技术简介;;离心力:当一个粒子(生物大分子或细胞器)在高速旋转下受到离心力作用时,此离心力“F”由下式定义,即:

F=m·a=m.V2/r=m·ω2r

a—粒子旋转的加速度,m—沉降粒子的有效质量,

ω—粒子旋转的角速度,r—粒子的旋转半径(cm)。

;相对离心力:离心力常用地球引力的倍数来表示,因而称为相对离心力“RCF”。或者用数字乘“g”来表示。

相对离心力是指在离心场中,作用于颗粒的离心力相当于地球重力的倍数,单位是重力加速度“g”(980cm/sec2),

相对离心力RCF可用下式计算:

RCF=1.119×10-5×(rpm)2r

(rpm—revolutionsperminute每分钟转数,r/min);由上式可见,只要给出旋转半径r,则RCF和rpm之间可以相互换算。但是由于转头的形状及结构的差异,使每台离心机的离心管,从管口至管底的各点与旋转轴之间的距离是不一样的,所以在计算时规定旋转半径均用平均半径“rav”代替:

rav=(rmin+rmax)/2

;?

;制备性离心机可分为三类:

普通离心机:最大转速6000rpm左右,最大相对离心力近6000×g,容量为几十毫升至几升,

高速冷冻离心机:最大转速为20000~25000rpm(r/min),最大相对离心力为89000×g,最大容量可达3升,

超速离心机:转速可达50000~80000rpm,相对离心力最大可达510000×g,最著名的生产厂商有美国的贝克曼公司和日本的日立公司等,离心容量由几十毫升至2升;;(2)分光光度计

;;;(3)电热恒温水浴锅;三、试剂配制;2.准确称量、量取

;3.溶解;四、实验误差与克服;在相同条件下多次测量同一物理量时,测量误差的大小和符号都不变;在改变测量条件时,它又按照某一确定规律而变化的测量误差称为系统误差。

系统误差的特点:

和偶然误差不同,它不具有抵偿性,即在相同条件下重复多次测量,系统误差无法相互抵消。

产生系统误差的诸因素是可以被发现和加以克服的。

;消除产生系统误差的根源

从产生误差的根源上消除系统误差是最根本的方法。通过对测量过程中可能产生系统误差的各种环节作仔细分析,找出原因并在测量前加以消除。

如果系统误差是由外界条件变化引起的,应在外界条件比较稳定时进行测量。

;采用修正法消除系统误差

预先将仪器的系统误差检定出来或计算出来,做出误差表或误差曲线,然后取与误差数值大小相同、符号相反的值作为修正值,进行误差修正。

即:x真=x测+x修

如天平砝码不准,应采用标准砝码进行校核,确定每个砝码的修正值。在称量时就应加上相应砝码的修正值,容量瓶、滴定管、移液管等容量仪器均可用水重量法求出各自的修正值。;对消法消除系统误差

进行两次测量,使两次读数时出现的系统误差大小相等、符号相反。两次测量值的平均值作为测量结果,以消除系统误差。

例如,由于仪器灵敏度的限制,测量仪器的旋钮由右边调近测量值与由左边调近测量值的结果往往不同。这时,可取两个读数的平均值作为测量值。

;在实验时即使采用了最完善的仪器、选择了最恰当的方法、经过了十分精细的观测,所测得的数据也不可能每次重复,这样的误差即为偶然误差

;偶然误差的克服

偶然误差是由于相互制约、相互作用的一些偶然因素所造成的,它有时大、有时小、有时正、有时负,方向不一定,大小和符号一般服从正态分布规律。偶然误差可采取多次测量,取平均值的办法来消除,而且测量次数越多(在没有系统误差存在的情况下),平均值就接近于真值。;五、实验室安全知识简介;(二)实验室灭火;(三)实验室急救;六、实验记录及实验报告;课前预习

实验课前要将实验名称、目的和要求、实验内容与原理、操作方法和步骤等简单扼要地写在记录本中,做到心中有数。

;实验记录

准备一本正规的笔记本作为实验记录本。

将实验条件下观察到的现象仔细地记录下来。

将实验中观测的每个结果和数据及时如实地记录。

实验中使用仪器的类型、编号以及试剂的规格、化学式、分子量、准确的浓度等,也应记录清楚。;实验报告

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