QC-09 培养基管理规程.docVIP

培养基管理日期 审核日期 年 月 日 批准人 批准日期 年 月 日 颁发部门 生效日期 年 月 日 分发部门 附件 1．0目的 通过实施本程序，使培养基的配制准确、规范、标记清楚、记录真实及时、按规定贮存，保证检验结果的准确性。 2．0范围适用于化验室所用培养基的配制、使用与管理。 术语 培养基：指供微生物检定、无菌检查、微生物限度检查、环境检测使用的，按一定比例配制的营养物质。 0职责 ．1QC负责所使用的培养基的配制、灭菌、标识、贮存、使用与管理。 2QA负责化验室培养基日常使用情况的监督、检查。 5．0管理程序 51培养基的采购 5.1.1 5.1.2采购的所有培养基均应包装完好，封口严密，标签完整、内容清晰，贮存条件明确。 5.1.3依据其标签上规定的贮存条件分类贮存。 52培养基制备前所用器皿的准备工作 5.2.1配制培养基所用的玻璃器皿，如试管、三角瓶和茄瓶等在使用前，首先用毛刷蘸洗涤剂将其刷干净，用饮用水冲洗干净后，再用纯化水冲洗2～3次，晾干备用。必要时于121±2℃灭菌半小时，备用。 53试剂与溶剂 5.3.1配制培养基必须使用正规厂家生产的生物试剂，所用化学试剂必须是分析纯和化学纯，所用的全部试剂尽量固定厂家，更换生产厂家和批号时，必须做灵敏度试验和检验结果对照。 5.3.2配制培养基使用的水均指新鲜的纯化水，纯化水必须符合中国药典2005年版的规定，除另有规定外，一般纯化水存放不得超过4天。 54培养基的配制 5.4.1培养基的称量 按照中国药典2005年版中规定的培养基配方称量各成分，进行配制。称量时，由一人称量，另一人对称量的全过程进行复核。配制培养基时，称量要迅速以免吸潮而影响称量的准确性。 5.4.2培养基的配制与分装 上述培养基按照规定的方法进行制备，除葡萄糖和指示液外，将处方中各成分加水后置电炉、可调电磁炉或其他适宜的加热设备中，微温使溶解。进行分装时，一般三角瓶其装量不得超过本身容积的2/3，小试管分约15ml，中试管分装约40ml～50ml，大试管分装约100ml，试管分装其装量不得超过试管的2/5，以免灭菌时溢出。 5.4.3培养基的灭菌 培养基在分装后，放入不锈钢筐内并用牛皮纸包好，无菌检查培养基和微生物检定培养基以115℃灭菌30分钟，微生物限度检查培养基以121℃灭菌20分钟。培养基按要求严格控制灭菌温度，不可过高，以免培养基营养被破坏或颜色加深而影响检品的观察。灭菌后的培养基、器具要在灭菌器中，降温、干燥后取出，切勿在温度100℃以上，并未干燥的情况下取出，以免试管塞蹦出，造成染菌 培养基的灭菌应采用验证合格的灭菌程序进行，培养基只能进行一次蒸汽灭菌处理。固体培养基使用前的融化，不宜使用蒸汽菌柜融化琼脂培养基，宜选用沸水浴或其他适宜的方法融化培养基。 55填写培养基配制记录，内容一般包括：名称、配制量、配方、操作方法中重要参数（时间、压力、温度）、配制日期、配制者、截止使用日期等。 56在已灭菌的培养基容器外做好标记，注明培养基名称、编号、配制日期、有效期等。管装培养基必须在筐上挂牌标示，注明培养基名称、编号、配制日期、有效期等。 57培养基的适用性检查 5.7.1培养基的检查包括无菌检查和灵敏度检查。 5.7.2培养基的无菌检查可在供试品的无菌检查前或与供试品的无菌检查同时进行，但是，一旦所用培养基不符合无菌要求，供试品的无菌检查结果应视为无效。 无菌性检查：每批培养基随机取不少于5支（瓶），培养14天，应无菌生长。如发现染菌，必须将培养基灭菌后废弃。 5.7.3培养基灵敏度检查 对购进的每一批号的脱水培养基在使用前都应进行灵敏度检查，检查合格后方可使 用，当培养基的配制方法和灭菌程序发生变更时，应再次对培养基的灵敏度进行检查。培养基在更换批号或生产厂家时，必要做灵敏度检查。 菌种 培养基灵敏度检查所用的菌株传代次数不得过超过5代（从检验所获得的冷冻干燥菌种为第0代），并采用适宜的菌种保藏技术，以保证试验菌株生物学特征。 金黄的葡萄球菌（Staphylococcus aureus）[CMCC(B)26 003] 铜绿假单胞菌（Pseudomonas aerginosa）[CMCC(B)10 104] 枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）[CMCC(B)63 501] 生孢梭菌（Clostridium sporogenes）[CMMCC(B)64 941] 白念珠菌（Candida albicans）[CMCC(F)98 001] 黑曲霉（Aspergilles niger）[CMCC(F)98 003] 有关菌种的传代、纯化、保存的内容见《附录E》 菌液配备 接种金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、枯草芽孢杆