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解剖学研究
维普资讯
解剖学研究 2006年第 28卷第 3期 AnatRes.2006.Vol28.No.3
· 论 著 ·
人精子顶体膜相关蛋 白SAMP32
DNA避孕疫苗的构建
臧卫东 陈雪梅 任秀花 石冰涛 赵青赞 曹 静 郝 莉
(郑州大学基础医学院人体解剖学教研室,郑州450052)
摘【要】 目的 探讨构建hSAMP32DNA疫苗的方法。方法 根据GenbankhSAMP32eDNA序列设计引物,RT.PCR
得到hSAMP32DNA,将其亚克隆至 pGEM.T载体 ,酶切鉴定后测序 ;再构建 peDNA3.1(+)-hSAMP32质粒 ,并对质粒 DNA
定量。结果 (1)人睾丸组织中提取的总RNA显示 2条清晰条带,分别对应28S、18S;RT.PCR扩增产物与预期 的目的基
因hSAMP32长度一致 ;(2)RT-PCR产物与载体 pGEM.T连接后测序 ,显示其与 Genbank的hSAMP32基因序列一致 ;(3)超
螺旋的peDNA3.1(+)-hSAMP32DNA疫苗不含 内毒素。结论 应用亚克隆技术构建 hSAMP32DNA避孕疫苗的载体
peDNA3.1(+).hSAMP32,为研制避孕疫苗奠定实验基础。
【关键词】 精子; 顶体; 免疫避孕; DNA避孕疫苗
Construction ofthehnmanspernlacrosomalmembrane.associated protein SAMP32DNA contraceptivevaccine ZANG
Wei-d0,lg,CHENXue-mei,RENXiu-hua,SillBing-tao,ZHA0Qing-zan,CA0Jing,HA0Li.DepartmentofAnatomy,
BasicMedcialcollege,ZhengzhouUnivers ,Zhengzhou450052 China
A【bstract】 Objective Toestablisht|leDNAcontraceptivevaccineofhSAMP32.Mehtods ThehSAMP32DNAWSS
acquiredbyRT-PCR basedonthehSAMP32sequencein Genbank,andsubcloned intopGEM-T-vector;na dhteesquenceWaS
detectedafterdigestion.ThenhtepeDNA3.1(+)-hSAMP32plasmidDNAWas constructednadqunatifide.Results (1)The
distincttotalRNA bnadscorrespondingto28Sna d 18S clearlywereisolatedfrom humna testistissue. Th elength ofamplifide
RT-PCRproductWaseonsistantwihthtatofproposedtargetgene,hSAMP32.(2)ThesequenceofRT-PCRproductlinkde wiht
pGEM-TvectorWasCO-incidentwitIlhtatofhSAMP32inGenbnak.(3)ThesupercoiledpeDNA3.1(+)-hSAMP32containedno
endotoxin.Conclusion EstablishmentofDNAimmuno-vaccinepeDNA3.1f+)-hSAMP32byusingsubcloningtechniquemay
provideexperimental baedforresearchofcontraceptivevaccnie.
K【eywords】 Sperm; Aerosome; Immuno-conrtaception; DNAcontraceptivevaccine
近年来,免疫不孕作为一种控制人 口急剧增长
1 材料和方法
的方法尤其在发展中国家得到广泛的关注If.。
精子抗原的免疫避孕疫苗技术的发展将有利于
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