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2012年上半年焦作进境皮张炭疽监测调查.doc
2012年上半年焦作进境皮张炭疽监测调查
[摘 要] 前言:本文通过对焦作地区2012年上半年进境皮张抽样进行炭疽监测调查,分析测定那些来源国家进境皮张中可能携带炭疽疫病,及炭疽疫病在进境皮张中是否存在隐性或潜在威胁。实验室检测:利用阿斯科利(Ascoli)实验,对抽取的100份试验样品,涉及357585张,来源7个国家的进境皮张进行炭疽检测及结果分析。讨论:目前盐渍的皮张携带炭疽的可能性相对较少,为进口皮张的检疫监管提供了确凿的试验数据,在保障进境皮张安全的同时,对保障我国人民身体健康也具有重要的意义。
[关键词] 进境皮张 检验检疫 炭疽 监测
焦作地区进境皮张深加工业的发展是伴随着我国改革开放的进程而逐步发展壮大起来的。目前主要品种包括盐渍绵羊皮、盐渍山羊皮及生牛皮等。根据河南出入境检验检疫局统计,从近11年时间来全省进口皮张数量来看,每年焦作进口皮张数量约占全省进口皮张总量的90~97%左右,年出口创汇多达几十亿美元,现已发展成为亚洲最大的鞋里皮生产加工销售基地和羊剪绒制品集散地。
炭疽杆菌病是由炭疽杆菌引起的一种人畜共患急性传染病,是一种重要的人兽共患自然疫源性疾病,现已列为国家二类疫病,而皮张中又极易携带和传播炭疽病,因此对进境皮张的炭疽检疫监测工作是十分重要和必须的。
实验室监测:现就2012年上半年焦作地区进境皮张情况进行检疫监测调查,具体调查方法及实验监测步骤如下:
一、调查方法
原则是根据来源国家、地区及进境皮张的品种等特点,涵盖2012年上半年进境皮张的所有典型皮张。从指定批次进境皮张中,随机选取有代表性样品进行实验室检测。
二、检测对象
抽取的有代表性进境皮张
三、实验采用标准
SN/T1700-2006《动物皮毛炭疽Ascoli反应操作规程》
器材:高压消毒器、50uL~200uL单通道移液器、普通冰箱、浸样瓶、反应管、显微镜、超净工作台、恒温培养箱、革兰氏染色液等
四、药品与诊断试剂
浸样液、炭疽沉淀素标准抗原、炭疽沉淀素阳性血清、炭疽沉淀素阴性血清
五、方法及步骤
1.在进境皮张专用原皮库中,抽取指定批次的皮张,选择根据国家质检总局及SN/T2123-2008《出入境动物检疫实验样品采集、运输和保存规范》及GB/T18088-2000《出入境动物检疫采样》要求,随机选取有代表性,优先采集有疑似病变部位,一般从每张皮的腿部或腋下剪取样皮一块约2cm2,装入特制的样品袋中,送实验室检测。
2.将样品及样品袋放入高压灭菌器中,103 kPa 121℃消毒30min。
3.高压灭菌后,将消毒后的样品去除脂肪,每5 块被检皮样为一组放入浸样瓶中,并记录样品编号和相对应的浸皮瓶号。按质量:体积=1∶10 的比例加入皮浸液,在室温下浸泡16~24h 后,中性滤纸过滤,其澄清液为被检样品。
4.对照试验
4.1炭疽沉淀素阳性血清对照试验
在一支加有100uL-200uL1:5000标准炭疽抗原的反应管中,徐徐加入等量的炭疽沉淀素阳性血清,抗原液面与血清接触面必须清楚。15分钟内判定结果。
4.2炭疽阴性血清对照试验
在一支加有100uL-200uL标准炭疽抗原的反应管中,徐徐加入等量的1:5000炭疽沉淀素阴性血清,抗原液面与血清接触面必须清楚。15分钟内判定结果。
5.样品试验
反应管中加入100uL-200uL的炭疽沉淀素阳性血清,作阳性血清对照反应管。同时另取一反应管加入等量的1:5000炭疽阴性血清,作阴性血清对照反应管。
将等量被检皮样抗原徐徐加入到试验反应管和阴性血清对照反应管中,使之形成清晰的界面。15 分钟内判定结果。
六、结果的判定
1.炭疽沉淀素阳性血清对照试验:两界面出现清晰、致密的白色沉淀环。
2.炭疽阴性血清对照试验:两界面无白色沉淀环出现。
3.被检样品试验
3.1阴性血清对照反应管:应呈阴性反应,两界面无白色沉淀环出现。
3.2对照实验成立后判定结果:
阴性反应:反应管中阳性血清与被检样品浸泡液界面清晰,并且没有出现白色沉淀环。
阳性反应:反应管中阳性血清与被检样品浸泡液界面清晰,并且出现致密的、明显的白色沉淀环。
可疑反应:反应管中阳性血清与被检样品浸泡液界面清晰,并且出现模糊、疏松、不明显的白色沉淀环。
七、检测结果分析
上半年在进口皮张进行检验检疫的过程中,抽取了100份试验样品进行炭疽检测及结果分析,涉及皮张数量357585张,来源7个国家。从100批进境皮张炭疽检测结果来看,抽取的样品中未发现其携带疑似炭疽病菌。
从以上图表中可以看出,澳洲进口皮张占抽
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