2012ABO疑难血型鉴定和新生儿溶血病课件.pptVIP

共29页 ABO疑难血型鉴定和新生儿溶血病 输血前免疫学检测 输血前检测： 血型鉴定：ABO血型（正反定型）、 RhD血型 抗体筛选 交叉配血：主侧、次侧 目的：准确定型，选择相容血液。 意义：输血安全、及时、有效。 人类血型系统 30个血型系统 目前被识别的血型抗原的总数达到328个，其中有284个抗原分别属于30个血型系统 红细胞血型系统 最具临床意义：ABO、Rh 临床意义：输血安全、器官移植、新生儿溶血病。 急性溶血性输血反应：ABO抗体与相应抗原结合后，能够激活补体，导致红细胞在血管内立即被破坏。 轻症：发热、腰背痛、血红蛋白尿或手术创口渗血。 重症：DIC、休克、急性肾衰竭，甚至死亡。 ABO血型系统 抗原抗体相对应：红细胞上缺乏相应抗原，血清中有相应抗体，组织细胞分泌液中有ABH抗原。其它血型系统没有的特性。 免疫原性最强的血型系统，抗体主要是IgM性质，可引起急性溶血性输血反应，在临床输血中的作用最重要。 ABO血型分子基础 ABO基因组DNA长度约30Kb，由7个外显子组成。 A和B基因编码的蛋白都是353个氨基酸，O基因编码的蛋白只有115个氨基酸。 B基因在cDNA上有七个核苷酸与A1基因不同，其中四个核苷酸的变化造成了氨基酸序列的变化。 O基因有两种： ①O1基因：最常见的O基因，在cDNA的第261位G缺失，提前终止转移酶的翻译，使其编码的蛋白只有115个氨基酸。 ②O2基因：261位G不缺失，很少见的O基因。 ABO抗原的发育 胚胎期开始产生，出生时还未发育完全，其抗原数只有成人的25～50％，与抗A和抗B血型试剂的反应也较成人弱。 新生儿ABO抗体也很弱，故新生儿定ABO血型是不需要反定型，通常在三个月后才进行反定型。 ABO血型鉴定方法 玻片法：瓷板、纸片 试管法：经典的试管离心方法仍被认为是最可靠 的ABO定型方法。 微量板法(U型或V型板)：大量标本 微柱凝胶法（卡式）：混合外观mf 分子生物学方法 ABO亚型 ABO亚型 ABO亚型 红细胞混合凝集(mf) 特征：有部分凝聚细胞，周围有大量游离细胞 类型：按抗原来源分，可分为外源性和内源性 ABO亚型：A3、B3 嵌合体：孪生子、双精嵌合 造血干细胞移植、异型输血、胎母出血 检测技术：分子生物学技术 cisAB cisAB的血清学特征： 与抗A的反应强度：和A1细胞接近； 与抗B的反应强度：弱于正常B，易被误定为B3/Bx,可显混合外观凝集 血清常含有弱抗B H抗原性强 家系调查和分子生物学方法确认cisAB表型 ABO正反定型不符合原因 假阴性结果 没有加抗体试剂 忽视溶血结果 试剂和细胞比例不当 离心时间、速度不足 试剂失效、用法错误 记录或结果判读错误 假阳性结果 离心时间、速度过大 试剂、细胞、盐水污染 实验容器不洁 记录或结果判读错误 ABO正反定型不符合原因 正定型：抗原 ABO亚型、cisAB 疾病致抗原减弱：白血病、淋巴瘤 红细胞被自身抗体致敏 红细胞被细菌污染造成多凝集现象 获得性B抗原：胃肠道疾病、酸化试剂 脐带血中有Wharton胶 混合外观凝集：亚型、骨髓移植、异型输血、嵌合体 ABO正反定型不符合原因 反定型：抗体 缗钱状凝集：球蛋白过高 自身抗体：冷凝集素 疾病：白血病、恶性淋巴瘤、骨髓移植、使用免 疫抑制剂、免疫缺陷、低丙种球蛋白血症 年龄因素：新生儿、老年人 近期内血浆置换 同种抗体：通常IgM性质 ABO疑难血型鉴定方法 了解样本情况：病史、采样 进行重复试验 重新采样 红细胞洗涤后配成3～5%浓度 用试管法，实验管在室温和4℃放置30分钟，阴性者用显微镜观察结果。 更换新的试剂 更换试验方法 ABO疑难血型鉴定方法 增加试剂：抗A1 、 抗H、 抗AB 增加细胞：自身、O细胞、脐血细胞(i抗原) 唾液血型物质鉴定 吸收放散试验 直接抗球蛋白试验 分子生物学实验 ABO正反定型不符分析 抗A 抗B 抗AB Ac Bc Oc 0 4＋ 4＋ 0 0 0 分析：血型可能是B型、A亚B型 抗体：患者年龄（老人/婴儿）、疾病诊断（白血 病、MM、免疫球蛋白缺乏等） 基因检测 ABO正反定型不符分析 抗A 抗B 抗AB 抗A1 Ac Bc Oc 4+ 0 4+ 0 0/+ 4＋ 0 分析：血型可能是A2亚型，血清中常