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第26卷 第3期 辐 射 研 究 与 辐 射 工 艺 学 报 Vbl-26.No.3
2008年6月 J.Radiat.Res.Radiat.Process. June2008
枯草芽孢杆菌淀粉酶高产菌株的辐射诱变研究
陈晓明 。 张 良 张建国 周莉薇
(西南科技大学生命科学与工程学院 绵阳 621010)
(西南科技大学核废物与环境安全国防重点学科实验室 绵阳621010)
摘要 采用了不同总辐照剂量和剂量率的Y射线以及快中子一次、二次辐照枯草芽孢杆菌,采用平板透明圈
方法,以菌落直径、透明圈直径、透明圈直径与菌落直径之比(HC值)为指标,研究 y和快中子辐照对枯
草芽孢杆菌产淀粉酶的辐射诱变效应,同时筛选高产淀粉酶的变异株。结果表明:(1)快中子和 丫射线都能
有效诱导枯草芽孢杆菌高产淀粉酶;(2)采用不同总辐照剂量和剂量率的丫射线和快中子一次辐照后,菌落
平均直径均比对照小,且随着丫射线辐照剂量的增大,菌落平均直径有变小的趋势;(3)采用快中子二次辐
照后,菌落平均直径、菌落最大直径、透明圈平均直径、透明圈最大直径以及 HC最大值都远远高于原菌落
值;(4)重复筛选出三株高产淀粉酶菌株,它们的菌落直径最大为 8.32mm,透明圈直径最大为22.38ram,
透明圈与菌落直径之比最大达到5.39。且有两株在传至15代都能稳定高产淀粉酶。
关键词 中子辐照,Y射线,辐射诱变育种,淀粉酶
中图分类号 O93,Q939.99,TL99,TS261.15
枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)是当今工业酶 niger,ATCC 9372),购于中国普通微生物菌种保藏
的主要生产菌种之一,主要用于生产淀粉酶、蛋白 中心。
酶和脂肪酶。同时还具有降解复杂碳水化合物果胶、
葡聚糖、纤维素等的酶,其中很多酶是哺乳动物和 1.2 辐射源
禽类不具有的。由于其具有产酶量高、种类多、安 Y射线辐照采用中国工程物理研究院钴源公司
全J陛好、环保等优点而在现代工业生产中被广泛应 的6~Co源;中子辐照在中国工程物理研究院核物理
用,其发酵生产的酶在食品、饲料、医药等领域均
与化学研究所的 CFBR.1I堆(Chinese fast burst
发挥着十分重要的作用【1l2】。
reactor II)上进行。CFBR.1I堆是一个以浓缩铀为
快中子和Y射线产生致密电离辐射,能使生物
活性区,以贫化铀和铜为反射层的快中子脉冲反应
染色体断裂而发生基因易位、倒位或缺失等结构变 堆flo】。
化,并对各种生物大分子造成不可修复的损伤口 】,
常用于诱变育种研究【6】。近年来,随着离子束研究 1.3 样品制备
的深入,离子束的辐射诱变育种研究及其应用在我
13.1菌体培养基 缓冲蛋白胨水(Buffered peptone
国开展得十分广泛r7 】。对于产量性状的诱变育种,
water,BP)培养基:牛肉膏3g,蛋白胨10g,NaC1
凡在提高诱变率的基础上,既能扩大变异幅度,又
5 g,水1000mL,pH7.0,琼脂25g。
能促使变异移向正变范围的剂量和方式,被认为是
1-3.2淀粉琼脂培养基 可溶性淀粉 5g,蛋白胨
合适的诱变育种处理手段【9】。本文通过研究快中子
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