B 一般试験法.PDF

Ｂ 一般試験法 Ｂ 一般試験法 １．亜硫酸塩定量法 亜硫酸塩定量法は，亜硫酸塩類をヨウ素と反応させた後，過量のヨウ素をチオ硫酸ナト リウムで逆 滴定し，反応に要したヨウ素の量か ら亜硫酸塩を定量する方法である。 操 作 法 別に規定するもののほか，次の方法による。 別に規定する試料の量を精密に量り，あらかじめ0.05mol/Lヨウ素溶液50ml を正確に量って入れ た共栓フラスコに入れて溶かし，栓をして5分間放置した後，塩酸(2→3) 2mlを加える。次に過量の ヨウ素を0.1mol/Lチオ硫酸ナト リウム溶液で滴定する(指示薬 デンプン試液)。 ２．イオンクロマ トグラフィー イオンクロマ トグラフィーは，イオン交換体な どを固定相 としたカラム中に，移動相と して溶離液 を流すことにより，カラムに注入された混合物をイオン交換能の差を利用してそれぞれの成分に分離 し，分析する方法であ り，液体試料又は溶液にできる試料に適用でき，確認試験，純度試験，定量法 等に用いる。 装 置 通例，移動相送液用ポンプ，試料導入部，カラム，検出器及び記録装置からな り，カラムは恒温槽 等によ り恒温に保たれる。ポンプは，カラム，連結チューブ等の中を一定流量で移動相を送液できる ものである。 検出器は，通例，電気伝導度計，紫外吸光光度計等が用い られ，移動相 とは異なる性質の成分を検 出するものであ り，通例，数 μg以下の物質に対して濃度に比例した信号を出すものである。記録装 置は，検出器によって得 られる信号の強さを記録するものである。なお，検出器として電気伝導度計 を用いる場合，サプ レッサを電気伝導度計の前に設けてもよい。サプ レッサは移動相の電気伝導度を 低減し，信号とノイズの比を大きくするためのものである。 操 作 法 装置をあらか じめ調整 した後，別に規定する操作条件に移動相，カラム，検出器及び移動相流量を 設定し，カラムを規定の温度で平衡にした後，別に規定する方法で調製した検液又は標準液若 しくは 比較液をマイクロシリンジ又は試料バルブを用いて試料導入部か ら導入する。分離された成分を検出 器によ り検出し，記録装置を用いてクロマトグラムを記録させる。物質の確認は，標準試料 と保持時 間(検液を注入 してから成分のピークの頂点が現われるまでの時間をいう。以下同 じ。)が一致する こ と又は標準試料を添加しても保持時間が変化せず ピークの幅が広がらないことで行う。定量は，ピー ク高さ又はピーク面積を用いて行い，通例，次のいずれかの方法による。 － 5 － (1) 内標準法 別に規定する内標準物質の一定量に対して標準被検成分を段階的に加えた標準液を 数種類調製する。標準液を一定量ずつ注入して得 られたクロマトグラムか ら，標準被検成分のピー ク高さ又はピーク面積 と内標準物質のピーク高さ又はピーク面積との比を求める。この比を縦軸 に，標準被検成分量と内標準物質質量 との比又は標準被検成分量を横軸にとり，検量線を作成する。 この検量線は，通例，原点を通る直線 となる。次に同量の内標準物質を加えた検液を別に規定する 方法で調製 し，検量線を作成したときと同一条件でクロマトグラムを記録させ，被検成分のピーク 高さ又はピーク面積 と内標準物質のピーク高さ又はピーク面積との比を求め，検量線を用いて定量 を行う。 (2) 絶対検量線法 標準被検成分を段階的にとり，標準液を調製 し，一定量ずつ注入する。得 られた クロマ トグラムから求めた標準被検成分のピーク高さ又はピーク面積を縦軸に，標準被検成分量を 横軸に とり，検量線を作成する。この検量線は，通例，原点を通る直線 となる。次に別に規定する 方法で検液を調製し，検量線を作成 したときと同一条件でクロマ トグラムを記録させ，被検成分の ピーク高さ又はピーク面積を測定し，検量線を用いて定量を行う。 なお，特に支障のない限り，陰イオン標準液を調製する場合には，ナト リウム塩又