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roni
中华神经创伤外科电子杂志2017年2月第3卷第 1期 ChinJNeurotraumaSurg(Elect
— — cEdition), . !! ., . ·33 ·
· 基 础研 究 ·
移植人羊膜间充质干细胞促进脑出血大鼠
神经功能恢复
周洪龙 张鸿 日 闰中杰 徐如祥
摘【要】 目的 研究移植人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)是否能促进脑出血大鼠神经功能恢
复,探索其可能作用机制。 方法 138只雄性Wistar大鼠按照随机数字表法分为人皮肤成纤维细
胞(Fibroblasts)治疗组 (46只)、磷酸盐缓冲液(PBS)治疗组 (46只)和hAMSCs治疗组 (46只)。脑出
血模型采用颅内注射Ⅶ型胶原酶制作,24h后颅内移植hAMSCs、Fibroblasts和PBS。应用流式细胞
仪检测hAMSCs表面抗原。免疫荧光检测细胞分化、血管再生和神经再生。酶联免疫吸附剂测定试
剂盒检测脑源性神经营养因子(BDNF)和血管内皮生长因子(VEGF),改 良神经功能评分(mNSS)检
测行为学。 结果 分离培养的hAMSCs呈现成纤维细胞样细胞形态 ,表达CD29、CD44、CD90、
CD105和CD166,不表达CD19、CD34和CD45。mNSS评分显示 ,颅内出血 (ICH)7d后 ,hAMSCs组
评分明显高于 Fibroblasts治疗组和 PBS治疗组 ,差异具有统计学意义 (P<O.05)。ICH后 14d,
hAMSCs组 BrdU细胞数 目(55.33~6.59)高于Fibroblasts组(26.66~3.58)和PBS组(25.50~2.90),差
异具有统计学意义 (P<O.05)。hAMSCs组 Brdu/DCX细胞数 目(30.66_+3.65)高于Fibroblasts组
(11.83~2.70)和PBS组 (10.00~2.54),差异具有统计学意义 (尸<0.05)。hAMSCs组血管性血友病因子
血管数 目[(67.50~6.76)m/mz]高于Fibroblasts组 【(31.66~6.33)m/mz]和PBS组 [(28.83~5.58)/mmq,差异
具有统计学意义 (P<O.05)。ICH后7d和 14d,hAMSCs组 BDNF表达水平 【(63.16~2_31)pg/mg,
(38.57~3.69)pg/mg]高于Fibroblasts组 [(46.18~2.45)pg/mg,(20.52~2.81)pg/mg]和PBS组[(43.18±
2.30)pg/mg,(18.28_+2.39)pg/mg】,差异具有统计学意义 (P<O.05)。ICH后7、14、21d,hAMSCs组
VEGF表达水平 [(43.32~3.65)pg/mg,(30.90~2.62)pgm/g,(24.89~2.85)pg/mg】高于Fibroblasts组
[(22.88±2.62)pg/mg,(15.41±2.40)pg/mg,(10.57±1.54)pg/mg]和 PBS组 [(20.81±3.06)pg/mg,
(14.44~2.32)pg/mg,(11.42~1.48)pg/mg1,差异具有统计学意义(尸<0.05)。移植的hAMSCs在颅内存
活最少27d,不表达神经元标志物 8一tubulinm和星型胶质细胞标志物胶质纤维酸性蛋白。结论
移植 hAMSCs能促进脑出血大鼠神经功能恢复 ,其作用机制可能是通过增加神经营养因子表达,促
进血管再生和神经再生。因此hAMSCs是治疗脑出血的理想干细胞。
【关键词】 间充质干细胞;羊膜;脑出血;移植;神经功能恢复
Transplantationofhumanamnioticmesenchymalstem ceHspromotesneurologicalrecoveryinan
intracerebralhemorrhageratmodelZhouHonglong,ZhangHongri1,Yonzh0n西 2XuRuxiangI.
1AffiliatedBayi曰 nHospital,ThePLAAr, Genera
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