移植人羊膜间充质干细胞促进脑出血大鼠神经功能恢复.pdfVIP

roni 中华神经创伤外科电子杂志2017年2月第3卷第 1期 ChinJNeurotraumaSurg(Elect — — cEdition)， ． !! ．， ． ·33 · · 基 础研 究 · 移植人羊膜间充质干细胞促进脑出血大鼠 神经功能恢复 周洪龙 张鸿 日 闰中杰 徐如祥 摘【要】 目的 研究移植人羊膜间充质干细胞(hAMSCs)是否能促进脑出血大鼠神经功能恢 复，探索其可能作用机制。 方法 138只雄性Wistar大鼠按照随机数字表法分为人皮肤成纤维细 胞(Fibroblasts)治疗组 (46只)、磷酸盐缓冲液(PBS)治疗组 (46只)和hAMSCs治疗组 (46只)。脑出 血模型采用颅内注射Ⅶ型胶原酶制作，24h后颅内移植hAMSCs、Fibroblasts和PBS。应用流式细胞 仪检测hAMSCs表面抗原。免疫荧光检测细胞分化、血管再生和神经再生。酶联免疫吸附剂测定试 剂盒检测脑源性神经营养因子(BDNF)和血管内皮生长因子(VEGF)，改 良神经功能评分(mNSS)检 测行为学。 结果 分离培养的hAMSCs呈现成纤维细胞样细胞形态 ，表达CD29、CD44、CD90、 CD105和CD166，不表达CD19、CD34和CD45。mNSS评分显示 ，颅内出血 (ICH)7d后 ，hAMSCs组 评分明显高于 Fibroblasts治疗组和 PBS治疗组 ，差异具有统计学意义 (P<O．05)。ICH后 14d， hAMSCs组 BrdU细胞数 目(55．33~6．59)高于Fibroblasts组(26．66~3．58)和PBS组(25．50~2．90)，差 异具有统计学意义 (P<O．05)。hAMSCs组 Brdu／DCX细胞数 目(30．66_+3．65)高于Fibroblasts组 (11．83~2．70)和PBS组 (10．00~2．54)，差异具有统计学意义 (尸<0．05)。hAMSCs组血管性血友病因子 血管数 目[(67．50~6．76)m／mz]高于Fibroblasts组 【(31．66~6．33)m／mz]和PBS组 [(28．83~5．58)／mmq，差异 具有统计学意义 (P<O．05)。ICH后7d和 14d，hAMSCs组 BDNF表达水平 【(63．16~2_31)pg／mg， (38．57~3．69)pg／mg]高于Fibroblasts组 [(46．18~2．45)pg／mg，(20．52~2．81)pg／mg]和PBS组[(43．18± 2．30)pg／mg，(18．28_+2．39)pg／mg】，差异具有统计学意义 (P<O．05)。ICH后7、14、21d，hAMSCs组 VEGF表达水平 [(43．32~3．65)pg／mg，(30．90~2．62)pgm／g，(24．89~2．85)pg／mg】高于Fibroblasts组 [(22．88±2．62)pg／mg，(15．41±2．40)pg／mg，(10．57±1．54)pg／mg]和 PBS组 [(20．81±3．06)pg／mg， (14．44~2．32)pg／mg，(11．42~1．48)pg／mg1，差异具有统计学意义(尸<0．05)。移植的hAMSCs在颅内存 活最少27d，不表达神经元标志物 8一tubulinm和星型胶质细胞标志物胶质纤维酸性蛋白。结论 移植 hAMSCs能促进脑出血大鼠神经功能恢复 ，其作用机制可能是通过增加神经营养因子表达，促 进血管再生和神经再生。因此hAMSCs是治疗脑出血的理想干细胞。 【关键词】 间充质干细胞；羊膜；脑出血；移植；神经功能恢复 Transplantationofhumanamnioticmesenchymalstem ceHspromotesneurologicalrecoveryinan intracerebralhemorrhageratmodelZhouHonglong，ZhangHongri1,Yonzh0n西 2XuRuxiangI． 1AffiliatedBayi曰 nHospital,ThePLAAr， Genera