红曲色素与桔霉素的分析福州大学现代教育技术中心ppt课件.ppt

红曲中桔霉素的分析检测;桔霉素的理化性质;桔霉素的化学性质;桔霉素的形成机理;红曲色素的分析检测方法;抑菌圈法;双向薄层层析;双向薄层层析;展开剂;展开剂;第 一 相 洗 脱 液;红曲样品双向展开示意图;高效液相色谱法;各国的桔霉素检测方法;高效液相色谱法;萃取次数实验;比较了ZORBAXEclipse XDB-C18( 5μm ,2 50X4.6mm) ,ZORBAXS BC 　　　　 18( 5μm ,2 50X4.6mm),NUCLEOSIL RP18 (5μm, 250X4.6mm)这三根C18柱对桔霉素定性定量检测的影响。;流动相的分析;流动相;流动相pH;在不同的流动相配比条件下桔霉素与其它杂质的分离效果比较;桔霉素的三个最大吸收峰：222.6nm、254nm、325nm;柱温 : 2 8℃ 桔霉素热稳定性差;在上 述 优 化的高效液相色谱条件下，用标准桔霉素作最低检测限试验，发现:当其质量浓度为0.05mg/l时,仍能检测到,并基线平稳。色谱图如下;桔霉素抗体的制备;N，N’-二环已基碳酰亚胺;透析;取少量连接物（ 0.1ml）溶于蒸馏水（ 2.9ml）中，280nm测吸光值，求其中蛋白质含量，根据BSA或OV的分子量，算出其摩尔数；同时取等量连接物溶于甲醇溶液中，320nm测吸光值，求出其中桔霉素的摩尔数，计算两者的摩尔数之比。;BSA /OV;; 每孔200μL,5%脱脂奶（ 溶于PBST），37℃保温保湿2h，待其恢复至室温，倾去封阻液， PBST满孔洗涤3次，每次5min，扣干。;抗原抗体反应;酶标二抗与抗体抗原复合物反应;底物显色反应;抗体的灵敏度; 每孔200μL,5%脱脂奶（ 溶于PBST），37℃保温保湿2h，待其恢复至室温，倾去封阻液， PBST满孔洗涤3次，每次5min，扣干。; 谢 谢！