- 10
- 0
- 约1.2万字
- 约 12页
- 2019-06-17 发布于四川
-
正版发售
- 现行
- 正在执行有效期
- | 2008-12-31 颁布
- | 2009-05-01 实施
- 1、本标准文档共12页,仅提供部分内容试读。
- 2、本网站所提供的标准文本仅供个人学习、研究之用,未经授权,严禁复制、发行、汇编、翻译或网络传播等,侵权必究。
- 3、本网站所提供的标准均为PDF格式电子版文本(可阅读打印),因数字商品的特殊性,一经售出,不提供退换货服务。
- 4、标准文档要求电子版与印刷版保持一致,所以下载的文档中可能包含空白页,非文档质量问题
查看更多
ICS 11.220
B 41
中华人民共和国国家标准
GB/T 22916—2008
水泡性口炎病毒荧光RT-PCR检测方法
Protocol of fluorogenic RT-PCR for vesicular stomatitis virus
2008-12-31 发布 2009-05-01 实施
发布
GB/T 22916—2008
-1.Z- —1—
刖 弓
本标准参考了世界动物卫生组织 (()IE) 《陆生动物诊断试验和疫苗手册 (哺乳动物、禽鸟与蜜蜂)》
(第5版)。
本标准的附录A为规范性附录,附录B为资料性附录。
本标准由中华人民共和国农业部提出。
本标准由全国动物防疫标准化技术委员会归口。
本标准起草单位 :中华人民共和国深圳出入境检验检疫局 、中华人民共和国云南出入境检验检
疫局c
本标准主要起草人:花群义、周晓黎、曾少灵、曹琛福、詹爱军、张彩虹、林庆燕、陈兵、杨云庆、孙洁。
T
GB/T 22916—2008
水泡性口炎病毒荧光RT-PCR检测方法
1范围
本标准规定了水泡性口炎病毒荧光RT-PCR检测的操作方法。
本标准适用于动物及其产品中水泡性口炎病毒的检测。
2缩略语
下列缩略语适用于本标准。
2. 1 荧光 RT-PCR
荧光反转录-聚合酶链反应。
2. 2 Ct 值
每个反应管内的荧光信号达到设定的阈值吋所经历的循环数。
2.3 RNA
核糖核酸。
2.4 DEPC
焦碳酸磷酯。
2.5 PBS
磷酸盐缓冲盐水 (配方见附录A)o
2. 6 Taq 酶
Tag DNA聚合酶。
2.7 VSV
水泡性口炎病毒。
3原理
水泡性口炎病毒属RNA病毒,根据水泡性口炎病毒两型共有基因特定的序列 ,合成一对特异性引
物和一条特异性的荧光双标记探针 。通过严格设计和筛选的引物和探针 ,涵盖水泡性口炎病毒的两个
型和突变株,为水泡性口炎病毒的特异性通用引物和探针 。探针的5 ’端标记FAM荧光素,它发出的荧
光能够被检测仪器接收,称为报告荧光基团;3'端标记TAMRA荧光素,它在近距离内能吸收5 ’端报告
荧光基团发出的荧光信号,称为淬灭荧光基团 。在扩增时 ,Taq酶发挥它的5'~3 ‘端外切核酸酶的功
能,将探针水解成单核昔酸,消除阻碍,标记在探针两端的报告荧光基团和淬灭荧光基团均游离于溶液
中,仪器检测到发出的荧光信号。
4材料与试剂
4.1仪器与器材
4.1.1荧光RT-PCR检测仪。
4. 1.2高速台式冷冻离心机(离心速度12 000 r/min以上)。
4. 1.3台式离心机(离心速度3 000 r/min) 0
4. 1.4混匀器。
4. 1.5 冰箱 (2 °C〜8 °C和一2(TC两种)。
4. 1.6微量可调移液器 (5 mL,10 mL,100 mL,1 000 ML )及配套带滤芯吸头。
1
GB/T 22916—2008
4. 1.7 Eppendorf 管 (1. 5 mL)、透明薄壁 PCR 管 (0. 2 mL)。
4.2试剂
4.2.1除特别说明以外,本标准所
您可能关注的文档
- GB T 22796-2009_被、被套_高清版_可检索.pdf
- GB T 22798-2009_毛巾产品脱毛率测试方法_高清版_可检索.pdf
- GB T 22799-2009_毛巾产品吸水性测试方法_高清版_可检索.pdf
- GB T 22800-2009_星级旅游饭店用纺织品_高清版_可检索.pdf
- GB T 22802-2008_家用废弃食物处理器_高清版_可检索.pdf
- GB T 22803-2016_鞋用纸板_高清版_可检索.pdf
- GB T 22806-2008_白卡纸_高清版_可检索.pdf
- GB T 22807-2008_皮革和毛皮 化学试验 六价铬含量的测定_高清版_可检索.pdf
- GB T 22814-2008_防锈原纸_高清版_可检索.pdf
- GB T 22832-2008_涂布美术印刷纸原纸(铜版原纸)_高清版_可检索.pdf
- 第12课 我们小点儿声 课件 二年级道德与法治上册(部编版).ppt
- 11.2我从哪里来(教学课件)二年级道德与法治下册(统编版).ppt
- 第10课 我们不乱扔 课件 二年级道德与法治上册(部编版).ppt
- 1.3过好我们的课余生活 课件五年级道德与法治上册(部编版).ppt
- 第四单元《法律保护我们健康成长》大单元整体学程设计道德与法治六年级上册统编版.pdf
- 第十一课:多姿多彩的民间艺术(分层练习)四年级道法下册 部编版.pdf
- 第八课:大家的“朋友”(分层练习)三年级道法下册 部编版.pdf
- 第5课 我爱我们班 课件 二年级道德与法治上册(部编版).ppt
- 第二单元 我们是公民 大单元整体学程设计道德与法治六年级上册统编版.pdf
- 人教部编版二年级语文下册第五单元单元教学课件.ppt
1亿VIP精品文档
相关文档
最近下载
- 部编版三年级语文下册《语文园地六》教学课件.pptx
- 雨污水溯源排查方案.docx VIP
- 计算机网络应用专业一体化课程方案.pdf
- MITSUBISHI三菱MELSEC iQ-F FX5-CCL-MS 硬件手册.pdf VIP
- MITSUBISHI三菱MELSEC iQ-F FX5-CCLGN-MS 硬件手册.pdf
- 《信息技术与高中数学教学整合研究》课题研究报告.doc
- 《发展经济学》课程思政教学案例.docx
- 护士资格《循环系统疾病病人的护理》心律失常病人的护理教学教案模板.doc
- 全球数字经济白皮书(2023年)-中国信通院-2024.1-.pdf
- -e长大后我就成了你声乐正谱钢琴伴奏五线谱.pdf
文档评论(0)