免疫八项常见的干扰因素及对策-专家课件汇编.pdf

发光免疫检测质量及常见影响因 素分析 以传染病8项为例 提纲 • 质量管理 室内质量控制 室间质量评价 • 常见影响因素及对策 室内质量控制（IQC） • 分析前质量控制 • 分析间质量控制 • 分析后质量控制 分析前质量控制（1） • 实验室环境、设施和设备 1、充分合理的空间、良好的照明、空调及 湿度维持设备 2、仪器设备应保养良好。定期维护保养、 年度校准、方法性能验证？ 分析前的质量控制（2 ） • 理想的测定试剂和方法 1、质量好的数据 2、标准的操作程序（SOP ） 3、试剂的储存（高温的记录和失控处理， 温度计） 试剂质量影响与对策 • 试剂盒原材料的纯度、组合、来源等也会造成 结果的假阳性或假阴性 • 不同厂家的试剂灵敏度与特异性也存在一定的 差异 • 试剂应选择灵敏度高、特异性好、稳定性好、 批间差小、操作方便、快速的优良检查试剂 • 国家参比实验室每年对各厂家的试剂进行质量 评估并定期公布评估结果，可作为选择试剂 的主要依据 对策：选择高质量的试剂是关键 分析前的质量控制是关键 • 人员培训 操作人员必须具备一定的技术知识和经验， 掌握免疫学的基本知识和原理 • 标本采集、标本前处理因素 标本采集、标本前处理因素 • 标本凝固不全（凝集血） • 标本管中添加物质的影响 • 纤维凝块（促凝剂或抗凝血） • 纤维蛋白（促凝剂或抗凝血） 标本凝固不全—干扰与对策 • 血液通常30min开始凝固，18—24h完全凝 固。日常检验时血液还没完全凝固就分离 血清，此时分离出来的血清中残留部分纤 维蛋白原，检测结果易造成假阳性 • 次日复查时因血凝已完全，血清中不再具 有纤维蛋白存在，故复查结果变为阴性 • 对策：血液标本采集后必须使其充分凝固 后再分离血清 标本管中添加物干扰与对策 • 酶抑制剂（如NaN3可抑制辣根过氧化物酶 活性）及快速分离的分离胶等均对免疫测 定有一定干扰作用 • 如果在检测中，更多的应从标本因素方面 进行分析，并应采取相应的措施排除干扰 作用 纤维凝块干扰 纤维凝块是由于离心前血清凝固不完全所致 如果纤维蛋白凝块随标本分配到试管中，血 凝块产生大量的微颗粒物质和具有AP活性的 物质 AP活性的物质在酶反应会产生测试信号，导 致假阳性结果 微纤维干扰 当血液凝集不充分时产生不成熟纤维即微纤 维 微纤维可与微粒和结合物连接，引起非特异 性反应，导致假阳性结果 纤维凝块或微纤维干扰对策 离心前，血液凝集完全十分重要 采血后，正确的混匀，充分的凝集时间和离 心 采血 颠倒混匀 静置 离心分离 血清或血浆获取 纤维凝块或纤维干扰（HBsAg) 没有颠倒混匀，颠倒混匀不彻底影响很大 离心时间影响也很大，应3000rpm离心15min 真空采血管颠倒混合方法 分析中的质量控制 • 校准：何时做？如何判断？校准失败如何 处理？ • 首先进行外部质控品的检测，在控后，在 进行患者标本检测 • 记录失控数据，按照质控规则判断结果是 否在控 • 失控：查找原因，重新检查质控 • 在控：逐一审核报告 分析后的质量控制 • 结果审核程序 阳性复检（HIV、HCV和TP ） • 肝炎标志物结果分析及报告程序 • HIV1/2抗体初筛实验结果报告程序 • 与临床的联系和沟通 室间质量评价EQA （1） • 参与室间质控网：根据实验室的具体情况 而