中药常规检验PPT参考幻灯片.ppt

中药组成复杂，产生疗效的不是某单一成分，检测任何一种活性成分均不能反映中药的整体疗效。 但是借鉴化药质量控制模式，测定某一味药味的有效成分、活性成分、指标性成分的含量的方法，对于控制中药质量起着不可替代的重要作用。 通过测定中药中有效成分、毒性成分或某些指标性成分的含量来衡量其生产工艺的稳定性和中药材的质量优劣，以保证中药的质量，达到临床用药安全、有效的目的。 检查含量的必要性 * 本法是将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、 缓冲剂等作为流动相, 用泵将流动相压入装有填充剂的色谱柱, 注入供试品, 经流动相带入柱内, 用记录仪记录色谱图, 从而达到定性及定量的目的。本法应用范围比气相色谱广, 只要样品能制成溶液, 就可进行分析, 尤其是中药的含量测定, 更为适用。 高效液相测定法的原理 * 1、色谱条件与系统适用性试验 根据《中国药典》项下对各品种的规定，选择色谱柱、流动相、检测波长；并核对检测后的理论板数。 2、对照品溶液的制备 根据《中国药典》项下对各品种的规定，按其要求完成对照品的称重、配制。 3、供试品溶液的制备 根据《中国药典》项下对各品种的规定， 按其要求完成样品的粉碎、称重、提取、制备。 4 测定法 分别将对照品与供试品溶液按《中国药典》要求注入色谱仪，通过所得数据用外标法进行计算，得出结果并打印保存图谱。 高效液相测定法方法简介 * 高效液相测定法注意事项 1、贮液器：尽可能使用HPLC的溶剂和试剂。含有缓冲盐和非HPLC的流动相一定要通过0.5um的过滤器。改变流动相时应防止交叉污染，陈旧的流动相和用久了的试剂瓶应定期废弃，防止生长微生物和组分改变。贮器内壁定期清洗，里面的附件要经常更换。 2、泵： 密封垫圈是最易磨损的部件。密封垫圈的损坏可引起系统的许多故障。最好3个月换一次垫圈。要注意防止因泵堵塞造成的压力过高而损坏柱塞杆或烧坏电机。延长垫圈寿命的措施（1）每次把泵的缓冲液洗干净，防止盐沉积，泵要浸在无缓冲液的溶液或有机溶剂中（2）用HPLC级试剂 * 3、进样器：停机后要用溶剂冲洗干净进样器内的残留的样品和缓冲盐，防止无机盐沉积和样品微粒造成阀转子面磨损或阻塞。严禁用尖针头进样。 4、柱：防止柱性能下降的措施：（1）溶剂的化学腐蚀性不能太强；（2）避免微粒在柱头沉降；（3）泵上要装压力限制器，防止压力过高冲击过大；（4）流动相ph＞7时用大粒度同种填料作预柱（5）柱头加烧结不锈钢滤片，需要时加保护柱。采用正确的制备样品方法和经常清洗柱也能延长寿命。 柱在不用时要保存好，要洗去缓冲液防止生长微生物。应加入大于10％的有机溶剂，将柱两端用盖拧紧，保持柱填料湿润不造成裂缝。 5、检测器：保持清洁，用后连同柱一起冲洗。提倡不定期用强溶剂反向冲洗检测池（拆开柱）用脱气流动相，以防空气泡卡在池内。不用时不开灯。 高效液相注意事项 * 由色谱柱引起的故障及解决办法 故 障 现 象 解决办法 过滤片阻塞 压力增高 N下降 峰形差 倒柱冲洗或换过滤片 柱头塌陷 峰分叉 N下降 修补柱头可恢复80%以上 样品阻塞 高压 用能溶解样品的溶剂冲洗柱 强吸附的样品 N下降 保留减小 强溶剂反冲 * 黄曲霉毒素测定法（通则2351） 为什么要测定？ 方法 注意事项 * 检查黄曲霉素的必要性 中药材采集后干燥或贮存不当，或在制备和加工过程中处理不善，可能污染在自然界普遍存在的黄曲霉而产生黄曲霉毒素，黄曲霉毒素具有极强的毒性和致癌性，故需对中药材及中药制剂中黄曲霉毒素含量进行控制。 * 黄曲霉的基本结构 黄曲霉毒素是一类结构相似的化合物，其基本结构都有二呋喃和香豆素。黄曲霉毒素在紫外线照射下，都能了出荧光，根据荧光颜色、Rf值及结构等不同，分别命名为B1、B2、G1、G2、M1、M2、P1、Q等。 B1 B2 G1 * 黄曲霉毒素测定法（2015） 本法系用高效液相色谱法（通则0512）测定药材、饮片及制剂中的黄曲霉毒素（以黄曲霉毒素B1、B2、G1、G2总量计），除另有规定外，按下列方法测定。 规定：B1≤5μg/kg，G2+G1+B2+B1的总量≤ 10μg/kg。 黄曲霉毒素品种 决明子 柏子仁 地龙 胖大海 肉豆蔻 莲子 远志 蜈蚣 陈皮 槟榔 桃仁 酸枣仁 麦芽 僵蚕 大枣 薏苡仁 * 黄曲霉毒素测定法（2015） 色谱条件与系统适用性试验 以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-乙腈-水（40：18：42）为流动相，流速每分钟0.8ml；采用柱后衍生法检测，衍生溶液为0.05%的碘溶液（取碘0.5g，加入甲醇100ml使溶解，用水稀释至1000ml制成），衍生化泵流速每分钟0.3ml，衍生化温度70℃；以荧光检测器检测，