7.2葡萄糖的检测.pdf

葡萄糖的检测 一、发展历史 尿轮(urine wheel) 古代印度：蚂蚁尝尿 二、标本因素 检测标本 全 血 脑 胸 尿 间 血 浆 脊 膜 液 质 或 液 液 液 血 清 三、血糖检测方法 1. 决定性方法：同位素稀释气相色谱-质谱法 概述 2. 常规方法——酶法 ①葡萄糖氧化酶法 ②己糖激酶法 ③葡萄糖脱氢酶法 四、酶法特点 酶法的特点： 1. 具有良好的特异性； 2. 便于检测：吸光度或电流改变； 3. 应用广泛：自动生化分析仪或POCT仪器。 五、酶法检测的原理 1.葡萄糖氧化酶法 分光光度法 （用于自动生化分析仪和POCT ） β -D-葡萄糖 + O →D-葡萄糖酸 + H O 2 2 2 H O + 显色氧受体→色原体 （505nm) + H O 2 2 2 测定电流 （用于POCT ） β-D-葡萄糖+ O →D-葡萄糖酸内酯+ H O 2 2 2 + - H O →2H +O + 2e 2 2 2 2. 己糖激酶法 （用于自动生化分析仪） 己糖激酶 葡萄糖 葡萄糖-6-磷酸 ATP ADP 葡萄糖-6-磷酸脱氢酶 6-磷酸葡萄糖酸内酯 NADP+ NADPH + H+ NADH和NADPH在340nm有吸收峰，而 + + NAD 和NADP 没有 样品中葡萄糖浓度与340nm吸光度值的变化 成正比 脱氢酶指示系统：利用NADH和NADPH在 340nm吸光度值的升高或降低进行定量检测 的系列方法。 指示反应： + + + NAD （NADP ）+ 2H ⇌ NADH （NADPH ）+ H 举例：乳酸脱氢酶反应： 问题：请总结还有哪些生化检验项目是通过 “ 脱氢酶指示系统”完成检测的？ 思维拓展：利用 “脱氢酶指示系统”还可以 建立哪些新的检验项目？ 己糖激酶法是测定葡萄糖的参考方法，目 前也用于常规检测 适用于血液、尿液、脑脊液中葡萄糖的测定 六、血糖计 血糖计：当葡萄糖浓度 血糖计的原理 ≥100mg/dL时，其允许 误差范围是≤15 ％