绿脓杆检验技术.ppt

化妆品中铜绿假单胞菌 (Pseudomonas aeruginosa 的检测  目的 1.了解化妆品中铜绿假单胞菌检测的基本过程 掌握几种培养基的配置方法。 3.掌握铜绿假单胞菌的鉴定及生化特征。 原理: 铜绿假单胞菌为需氧及兼性厌氧的革兰氏阴性杆菌, 有鞭毛,在普通培养基上生长良好,菌落大小不 平均直径2mm~3mm,扁平,边缘不整齐,且常 呈相互融合状态。氧化酶阳性,能产生绿脓菌素 此外还能液化明胶,还原硝酸盐产生氮气,在42℃ 条件下可以生长,可与类似菌区别。  操作步骤 检样前化妆品的处理 接样于营养肉汤增菌,37℃, 2h,4Orm培养 配十六烷基三甲基溴化铵培 养基(选择性培养基,大肠杆菌 分离培 取培养物接于 长,革兰氏阳性菌生长完 抑制) 配绿脓菌素测定用培养基, 明胶培养基,硝酸盐蛋白胨 水培养基,普通琼脂斜面培 染色镜检  操作步骤 特征性检验 氧化酶 绿脓菌素 硝酸盐还原 明胶液化 42℃生长 试验 试验 产气试验 试验 试验 取菌+1滴接菌,37℃ 接菌 接菌 接菌 基对24h+氯仿 37℃24h 37℃24h 42℃24h 移出+盐酸 紫红色(+)紫红色(+)有气体(+ 容解成液状(+)生长(+) 不变色(-)不变色(-)无气体(-) 未溶解(-) 不生长(-)  实验一培养基的制备及细菌的 分离培养  实验目的 掌握培养基制备的原理和方法 掌握细菌的分离培养 了解灭菌方法  实验原理 不同的微生物生长繁殖都需要提供一定的营养条件 在实验室中,微生物的营养是由培养基来提供的。培养基是 按照微生物生长繁殖所需要的营养物质,用人工方法配制而 成的营养基质。 除营养条件以外,微生物必须在最适酸碱度范围内才表 现出最大生命力,因此,应针对不同的微生物将培养基的pH 值调节到适当范围  操作步骤 按培养基 加水加 调节 灭菌 配方称量 热熔化 pH值 备用  操作步骤 1.绿脓菌素测定用培养基300m 加热溶解口调pH口分装试管口高压口制成斜面 2.明胶培养基300ml 加热溶解口调pH口分装试管口高压口直立制成高层 3.硝酸盐蛋白胨水培养基300m 加热溶解口调pH口分装有小倒管的试管口高压口直立 制成高层 4.普通琼脂斜面培养基300m 加热溶解口调ρH口分装试管口高压口制成斜面  注意事项 培养基溶解时,加有琼脂的培养基易 沸,应注意看守 注意调节培养基的pH 3.称牛肉膏用玻片,称甘油用小烧杯。 4.加热后应补足液量 5.注意做好标记