实验六 虎杖中大黄素的提取、分离和检识.pdf

实验六 虎杖中大黄素的提取、分离和检识 虎杖又名阴阳莲、土地榆、苦杖，为蓼科植物虎杖（Polygonum cuspidatum siebet Zucc ．）的根茎。有活血化瘀，清热解毒，祛痰止咳等功用。近年来用于治 疗急性黄疸，降低血脂，升高白血球和血小板，并可治疗慢性气管炎等多种炎症 及烧伤等症。虎杖根茎中含有大量的蒽醌成份和二苯乙烯类成份。 一、虎杖根茎中已知主要成份的理化性质 1．大黄酚（Chrysophanol ）：金黄色片状结晶（丙酮）或针状结晶（乙醇）， mp196~197 ℃，能升华。可溶于苯、氯仿、乙酸、乙醇。NaOH 水溶液及热 的 Na CO 水溶液。微溶于石油醚和乙醚，不溶于水，NaHCO 和 Na CO 水 2 3 3 2 3 溶液。 2 ．大黄素（Emodin ）：橙黄色针状结晶，mp256~257 ℃，能升华。易溶于乙醇， 可溶于 NH OH、Na CO 和 NaOH 水溶液，几乎不溶于水。 4 2 3 3 ．大黄素甲醚（Physion ）：砖红色针状结晶，mp206 ℃，能升华。易溶于NaOH 溶液，可溶于苯、氯仿、吡啶、甲苯，微溶于乙酸、乙酸乙酯、乙醚，不溶 于水。 4 ．大黄素葡萄糖苷（Emodin monoglucoside ）：浅黄色针状结晶（稀乙醇中析出， 含分子结晶水），mpl90~191 ℃。 5 ．白藜芦醇（Resveratol ）：无色针状结晶，mp256~257 ℃，216 ℃，264 ℃，能 升华。易溶于乙醚、氯仿、甲醇、乙醇、丙酮等。 6 ．虎杖苷（白藜芦醇葡萄糖苷，Polydatin ，Piceid ）：无色针状簇晶，mp223~226 ℃ （分解）。易溶于甲醇、乙醇、丙酮、热水，可溶于乙酸乙酯，Na2CO3 和 NaOH 的水溶液，微溶于冷水，难溶于乙醚。 16 二、目的要求 1．掌握从虎杖中提取羟基蒽醌类成份的方法。 2 ．熟悉用硅胶柱层析方法分离混合羟基蒽醌类成份的一般操作技术。 3 ．熟悉羟基蒽醌类化合物的主要检识反应。 三、实验原理 本实验是根据游离蒽醌类成份能溶于含水氯仿的性质，先将原料的浓酸溶液 湿润后，加入含水氯仿进行回流提取，在回流过程中即可将结合态的蒽醌（苷类） 类成份水解成为游离蒽醌，这样就可连同原存在的游离态蒽醌成份，一并被含水 氯仿提取出来。也可根据虎杖中的蒽醌类成份能溶于乙醇的性质，采用乙醇提取， 又利用游离蒽醌类可溶于热的含水氯仿的性质，将乙醇提取物以含水氯仿热回 流，使游离蒽醌与蒽醌苷及其它极性较大的醇溶性杂质分离。 羟基蒽醌类化合物可以利用化合物酸碱强弱不同进行分离。其羧基或多个β －位酚羟基的可溶于碳酸氢钠溶液，具有一个β-位酚羟基的可溶于碳酸钠溶液， 故可以用 PH 梯度法进行分离，另外，也可根据化合物极性大小不同用硅胶柱层 析法进行分离。大黄素的极性比大黄素甲醚大，在吸附层析中吸附较牢，因此在 大黄素甲醚之后洗脱下来。 四、实验材料 虎杖粗粉、含水氯仿（水饱和）、苯、乙醇、柱层析用硅胶（100~160 目）、硅胶 -CMC 硬板、苯 ∶乙酸乙酯（8 ∶2 ）、乙醚、碳酸钠、氢氧化钠溶液、盐酸、点 滴板、1000cc 圆底烧瓶、蒸发皿、层析柱、试管、梨形分液漏斗、精制棉、循 环水泵、旋转蒸发器、电热套、水浴锅。 五、实验内容 （一）游离蒽醌的提取 方法一：称取虎杖粗粉 50 g，加 10%硫酸溶液 50ml，充分搅拌混匀，加氯仿 200ml ， 热水浴上回流提取 1 小时，过滤得氯仿滤液。药渣继用氯仿 200ml 回流 1 小时，过滤，合并两次氯仿提取液于圆底烧瓶中，加沸石数粒，水浴 上蒸馏回收氯仿至干（可减压抽干氯仿），得红棕色残留物。再加苯 30ml 于圆底烧瓶中水浴上回流半小时，过滤得苯滤液置于蒸发皿中，加柱层 析用硅胶粉 3~5g，搅拌均匀后于通风处晾干，得均匀样品粉末，供作柱