重金属对贝类毒性效应的研究应用进展.doc

重金属对贝类毒性效应研究进展 摘要 此次研究重金属对贝类毒性效应，其中包含镉和汞对贝类毒性效应。研究表明，镉对贝类重金属镉能够诱导SOD、CAT、GSH-PX三种氧化酶活性上升,而胁迫时间超出一定范围后,三种酶活性均会逐下降。在研究镉对贝类毒性影响时，关键着重抗氧化酶系活性影响和免疫功效探索。探明了金属硫蛋白、超氧化物歧化酶和溶菌酶基因表示对 Cd、Hg、弧菌复合胁迫响应情况；检测了 Cd、Hg 造成血细胞损伤，初步说明了四角蛤蜊对 Cd、Hg 胁迫响应机制。 关键词 重金属 抗氧化酶系统 胁迫 免疫 Abstract The study on the toxic effect of heavy metal in shellfish, including the toxic effects of cadmium and mercury on shellfish. Research shows that the rise of shellfish, cadmium cadmium can induce SOD, CAT, GSH-PX three kinds of enzyme activity, and the stress time exceeds a certain range, three kinds of enzyme activity will decline. In the study of effects of cadmium on shellfish toxicity, explore the effects and immune function is mainly the activity of antioxidant enzymes. Proven metallothionein, superoxide and lysozyme gene expression in response to Cd, Hg, Vibrio composite stress; detection of blood cell injury, caused by Hg Cd, the response mechanism of four to Cd, clam Hg stress. Keywords Heavy metal Antioxidant enzyme system Coercion Immune 1.镉对贝类毒性效应研究进展 1.1镉胁迫对贝类抗氧化酶系活性影响 取经重金属镉胁迫试验后青蛤血清,用于超氧化物歧化酶、过氧化氢酶、谷胱甘肽过氧化物酶活性测定。 1.1. 过氧化氢酶(CAT)活性采取钼酸铵中止法,以每毫升血清或每毫克组织蛋白每秒钟分解1μmolH202量为一个活力单位。 1.1. 超氧化物歧化酶(SOD)活性测定原理为:经过使用黄嘌呤/黄嘌吟氧化酶体系生成超氧化物阴离子。加入发色基团,发色基团可被由上述体系产生氧化物阴离子还原成为水溶性黄色甲染料,这么SOD活性经过抑制发生基团还原来测定。在本反应体系中SOD抑制率达50%时所对应酶量为一个SOD活力单位。 1.1. 受到镉胁迫后,青蛤血清和肝脏中抗氧化酶SOD、 CAT和GPx 活性可在短期内达成峰值,这表明Cd在青蛤体内富集能对机体造成氧化压力,同时有大量活性氧产物产生,这种刺激能使青蛤体内快速合成抗氧化酶,来进行清除和转运活性氧产物。以后伴随暴露时间延长,抗氧化酶系活力整体逐步下降,即青蛤清除活性氧、抵御外环境损伤能力降低。在部分时间点,试验组酶活力显著低于对照组,表明此时抗氧化酶活力受到了抑制。贝类处于对逆境胁迫含有高易感性不稳定状态,此时机体免疫系统遭到破坏而易于遭受来自外界病害。 1.1. 谷胱甘肽过氧化物酶(GPx)能够催化GSH产生GSSG,而谷胱甘肽还原酶能够利用NADPH催化GSSG产生GSH,经过检测NADPH降低许就能够计算出谷胱甘肽过氧化物酶活力水平。要求为每0.1ml血清在37°C反应5分钟,或每毫克蛋白质,每分钟扣除非酶反应作用,使反应体系中GSH浓度降低lumol/L为一个酶活力单位。 1.2镉胁迫对贝类免疫活性影响 1.2.1 软体动物含有体液免疫和细胞免疫功效，体液免疫系统由溶酶体酶，凝集素和抗菌肽等组成。细胞免疫在贝类免疫过程中起着关键作用. 血细胞吞噬作用是整个防御系统最关键过程，由识别，粘连，摄取，破坏和清除外源细胞等不一样阶段组成。贝类血细胞在营养物质转运，伤口修复，去除代谢产物或污染物等方面起着关键作用。贝类血细胞能够细分为两种关键类型：透明细胞和颗粒细胞。颗粒细胞关键负责吞噬作用，它们又能够分为噬酸性颗粒细胞，噬碱性颗粒细胞和中性颗粒细胞。贝类血细胞能够利用溶酶体酶和呼吸爆