w第十二章血清钙磷镁和微量元素检验.pptVIP

1、微量元素的缺乏症与过多症 缺铁性贫血 地方性甲状腺肿，呆小病 克山病，大骨节病 龋齿 血色沉着病 Wilson 2、微量元素与地方病：地方性甲状腺肿 3、微量元素与职业病：接触砷过多引起砷性皮肤癌 第二节 钙、磷、镁和微量元素测定 血清钙、磷、镁的测定 尿液钙、镁、磷的测定 铁、铜和锌测定 一、血钙测定 测定方法 物理法 火焰光度法 离子选择电极法 原子吸收分光光度法 同位素稀释质谱法 化学法 滴定法（氧化还原滴定、络合滴定） 比色法（邻甲酚酞络合法、甲基麝香草酚蓝法） 酶法 方法：离子选择性电极法 离子钙测定 参考范围：1.10～1.34mmol/L 在评价钙的生物学活性方面，以测定离子钙为佳。但从反映机体钙的总体代谢状况来说，总钙测定更为客观，两者不能完全相互替代。 迅速、简便、敏感性高，重复性好 影响因素：标本pH值的改变，添加剂，标本类型。 注意事项 测定离子钙最好用血清标本。当急需测定结果时，可用肝素化全血。血浆肝素浓度达到30 U／ml 时，能使离子钙浓度降低3 ％～5 ％，肝素综浓度应控制在15U/ml。 血标本应密封储存，防止其中二氧化碳丢失致使其pH 值增加，而钙离子浓度下降。标本置4 ℃可稳定6h ，储存时间过长，血内乳酸积聚，一方面乳酸根阴离子与大约相等的钙离子螯合使离子钙浓度下降；另一方面氢离子可使白蛋白释放出钙离子，从而增加钙离子浓度。 碱性试剂暴露于空气中易吸收二氧化碳，使试剂pH 值下降。 总钙测定 方法：滴定法、比色法、火焰分光光度法、原子吸收分光光度法、同位素稀释质谱法、酶法等 参考范围：2.03～2.54mmol/L 国际临床化学联合会（IFCC）推荐： 决定性方法：同位素稀释质谱法（ID-MS） 参考方法： 原子吸收分光光度法（AAS） 常规方法： 邻甲酚酞络合酮法（O-CPC） [原理] 血清中的钙离子在碱性溶液中与麝香草酚蓝（MTB）结合，生成一种蓝色的络合物（612nm）。加入适当的8-羟基喹啉，可消除镁离子对测定的干扰，与同样处理的钙标准液进行比较，可求出血清总钙的含量。 甲基麝香草酚蓝法（MTB） [评价] 显色稳定，线性范围大，溶血、黄疸无干扰，灵敏度高。操作简单，适合手工操作，也适用于自动化分析仪。 邻甲酚酞络合酮法（O-CPC） [原理] 邻甲酚酞络合酮 (o-cresolphthalein complexone, O-CPC)是一种金属络合染料，也是酸碱指示剂。在碱性环境中，能与钙和镁螯合生成紫红色的络合物，在575nm附近有特征吸收。同时和钙标准液比较即可测出血钙含量。在测定时，加入8-羟基喹啉消除镁离子的干扰。 [评价]操作简单、快捷、用血量少，其测定结果与参考方法很接近，适用于全自动分析。灵敏度很高，试剂配制最好选用重蒸馏水，测定器皿要洁净，最好用一次性塑料试管。 人体内的磷元素尚不能直接测定。在临床化学实验室进行的无机磷测定实际上只是直接分析磷酸盐阴离子（H2PO4-，HPO42-） 常用的方法有：磷钼酸法、染料法、酶法。 二、血磷测定 磷钼酸法—直接紫外测定法 [原理] 无机磷与硫酸、钼酸铵反应生成磷酸钼酸络合物，在340nm处有最大吸收峰。其吸光度与样本中无机磷的浓度成正比。 [评价] 本法快速、简便，准确度、精密度高。重复性好，线性范围宽。 磷钼酸还原法 [原理] 血清中的无机磷与钼酸盐生成磷钼酸化合物，再用还原剂（硫酸亚铁）将其还原成蓝色的钼蓝，620nm进行比色分析。 是测定血磷的常规方法。 [评价] 特异性较高，线性范围较宽，可用于自动分析仪。但此法灵敏度低，呈色易受还原剂的影响。 [参考范围] 0.97～1.62mmol/L。 酶法 是一个偶联反应，参与反应的酶有糖原磷酸化酶、葡萄糖磷酸变位酶及葡萄糖6-磷酸脱氢酶，反应中使NADP+还原成NADPH，在340nm测定其吸光度。该方法不受有机磷酸酯的干扰，可用于常规标本的自动分析 。 孔雀绿直接显色测定法，虽非常敏感，但影响因素多，显色不稳定，重复性也较差，不能用于常规检验。 染料法 A340nm 三、血镁测定 测定方法 物理法 原子吸收分光光度法（参考方法） 同位素稀释质谱法（决定性方法） 离子选择电极法（离子镁测定） 化学法（传统方法） 钙镁试剂比色法 达旦黄比色法 甲基麝香草酚比色法（常规方法）（EGTA） 酶法 新进展，将成为新的自动化方法 [参考范围] 0.67～1.04mmol/L。 二、尿液钙、镁、磷的测定 尿液中钙、镁、磷浓度的波动范围很大，影响因素较多，一般测定时不取随机尿，而采取24小时混合尿测定。 （一）尿液钙的测定 一般采用邻甲酚酞络合酮法或甲基麝香草酚蓝