第十章转座ppt-表面等离子共红振技术在相互作用研究中的应.ppt

杂种不育 在P雄×M雌的F1不育是因为M品系雌性细胞质内缺失一个66KD的转座阻遏蛋白， 因此引起了 P品系的雄性细胞核染色体上的P转座子自由转座，后代不育。 P元件 P因子全长2 907 bp，两端有31 bp的反向重复序列。 4个编码区、3个内含子。 体细胞中，只有内含子1、2被顺利切除，产生前3个外显子的功能型 mRNA，被翻译成66KD的蛋白——一种转座活性的抑制因子。 生殖细胞中，内含子3被切除，产生的成熟mRNA包括全部4个外显子并被翻译成87KD的转座酶，才能导致P因子转座和配子败育。 发生机制 体细胞中含有一种蛋白，结合在第3个外显子上，阻止这个内含子的剪接。 生殖细胞中缺乏这个蛋白，因此可以剪接第三个内含子产生编码转座酶的mRNA。 当雌果蝇为M型时，在卵中无阻遏物，这样导致了来自雄果蝇中的P因子使生殖细胞中转座酶活化。 没有P因子 没有阻遏物 第一节 概述 第二节 转座子的分类 第三节 转座发生的机制 第四节 真核生物的转座因子 第五节 反转录病毒和反转座子 1．反转录病毒 1.1 概念 转座：从DNA到DNA的转移； 反转座：从DNA到RNA再到DNA的转移过程。 反转录转座子/反转座子：一些真核细胞的转座子和反转录病毒的原病毒的一般组成结构相关，并且通过RNA中间体进行转座。 1.2 反转录病毒的生活史 反转录病毒整合在细胞的基因组中，作为一种内生病毒,像是一个溶源性细菌噬菌体，其行为作为生物遗传物质的一部分。 1.3 反转录病毒基因组的结构与功能 （1） 反转录病毒包括gag-po1-env基因 （2）反转录病毒RNA的末端是正向重复序列。 R序列差异很大，长10到80nt不等。 在5’端紧跟着R的是U5区，长80～100nt； 在3’端R的内侧是U3序列，长170～1260nt。 反转录病毒线型DNA的末端是LTRs,整合到宿主DNA中时，两端各丢失了2 bp LOGO 1 概念： 转座子（transponson,简称Tn）, 又称易位子，是指存在于染色体DNA上可以自主复制和位移的一段DNA顺序。 转座子可以在不同复制子之间转移，以非正常重组方式从一个位点插入到另外一个位点，对新位点基因的结构与表达产生多种遗传效应。 1951年McClintock-麦克林托克提出转座（Transposition）和跳跃基因(jumping gene)的新概念； 1967年Shapiro才在E.coli中发现了转座因子（transposable element）。 Barbara McClintock (1902-1992) Nobel Prize for Physiology or Medicine 1983 第二节 转座子的分类 1 转座因子的类型 1.1 插入序列 (Insertion sequence，IS) 最简单的转座子称为插入序列。 IS家族有很多成员，它们的结构相似 特征： ?两端都有短5-9bp的正向重复序列（direct repeats, DR）（靶序列）， ? 略长15-25bp的反向重复序列（inverted repeats, IR） 1kb左右的编码区，它仅编码和转座有关的转座酶。 2 复合转座子（composite transposon） 复合转座子是由两端的组件由IS元件组成，中间夹着一个或多个结构基因如某些抗药性基因和其它基因组成。 表 复合转座子的结构和功能 转座因子 长度(bp) 遗传标记 末端组件 方向 二组件的关系 组件的功能 Tn903 3100 KanR IS903 反向 相同 二者皆有功能 Tn9 2500 CamR IS 1 正向 推测相同 预计有功能 Tn10 9300 TetR IS 10R ? ? 有功能 ? ? ? IS 10L 反向 有2.5%的差异 无功能 Tn5 5700 KanR IS 50R ? ? 有功能 ? ? ? IS 50L 反向 1 bp的改变 无功能 第一节 概述 第二节 转座子的分类 第三节 转座发生的机制 第四节 真核生物的转座因子 第五节 反转录病毒和反转座子 转座过程： n?转座酶（transposase）催化IS的转座，它由IS编码。 n?首先转座酶交错切开宿主靶位点，然后IS插入，与宿主的单链末端相连接，余下的缺口由DNA聚合酶和连接酶加以填补，最终插入的IS两端形成了DR或靶重复。 1 类型 1.1 复制型转座 转座是伴随着新拷贝的复制。 两种酶：转座酶和解离酶。 TnA转座子 。 1.2 非复制型转座 一个位点移到另一位点。 ?一种酶：转座酶 。 ?供体中无