高中生物选修3优质学案4：1.2 基因工程的基本操作程序.docxVIP

高中生物选修3 PAGE PAGE 1 1.2　基因工程的基本操作程序 学习目标： 1.简述基因工程原理及基本操作程序。 2.明确获取目的基因的方法。 3.掌握将目的基因导入受体细胞的方法。 4.掌握目的基因检测与鉴定的方法。 知识体系梳理 一、目的基因的获取 1.从基因文库中获取 基因文库种类： 。 2.利用PCR技术扩增目的基因 (1)含义:是一项在生物体外　复制特定DNA片段　的核酸合成技术。 (2)原理:④　DNA双链复制　。? (3)过程:第一步,加热至90~95 ℃ DNA解链为⑤　单链　;第二步,冷却至　55~60 ℃　,引物与两条单链DNA　结合　;第三步,加热至70~75 ℃,　热稳定DNA聚合酶(Taq酶) (4)特点:　指数　形式扩增。? 3.人工合成法:如果基因较小,　核苷酸序列　又已知,可以通过　　　　　　用化学方法直接人工合成。? 二、基因表达载体的构建 1.组成:目的基因、　启动子　、　终止子　、标记基因。? 2.功能:使目的基因在受体细胞中稳定存在,并且可以　遗传　给下一代;使目的基因能够　表达　和发挥作用。? 3.启动子:位于基因的首端,是　RNA聚合　酶识别和结合的部位,能驱动基因转录出mRNA。? 4.终止子:位于基因的尾端,功能是终止　转录　。? 5.标记基因:鉴别受体细胞中是否含有　目的基因,从而将符合要求的受体细胞筛选出来。? 三、将目的基因导入受体细胞 1.转化:目的基因进入受体细胞内,并且在受体细胞内　维持稳定　和表达的过程。? 2.导入植物细胞的方法:　农杆菌转化法　、基因枪法、　花粉管通道法　。? 农杆菌特点:易感染　双子叶　植物和　裸子　植物;Ti质粒上的　T-DNA　可转移至受体细胞,并且整合到受体细胞　染色体的DNA　上。? 3.导入动物细胞的方法:　显微　注射技术。? 4.导入微生物细胞的常用处理方法:用　Ca2+　处理受体细胞,使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态,这种细胞称为感受态细胞　。? 四、目的基因的检测与鉴定 1.检测及方法 (1)检测转基因生物染色体的DNA上是否插入了　目的基因　,采用DNA分子杂交技术。? (2)检测目的基因是否转录出了　mRNA　,采用分子杂交技术。? (3)检测目的基因是否翻译成蛋白质,采用　抗原—抗体　杂交技术。? 2.鉴定:除了分子检测外,还需要进行　个体生物学　水平的鉴定,如抗虫、抗病鉴定等。? 重难点探究 1.基因工程的基本步骤中,哪几步用到了限制酶?哪几步涉及碱基的互补配对? 2.构建基因表达载体的目的是什么? 基因表达载体由哪些组分组成?各组分起什么作用? 3.转化的实质是什么?常见的转化方法有哪些? 基础智能检测 1．下列不属于获取目的基因的方法是(　　) A．利用DNA连接酶复制目的基因 B．反转录法 C．从基因文库中获取目的基因 D．利用PCR技术扩增目的基因 2．下列关于基因表达载体构建的相关叙述，不正确的是(　　) A．需要限制酶和DNA连接酶 B．必须在细胞内进行 C．抗生素抗性基因可作为标记基因 D．启动子位于目的基因的首端 3．将ada(腺苷酸脱氨酶基因)通过质粒pET28b导入大肠杆菌并成功表达腺苷酸脱氨酶。下列叙述错误的是(　　) A．每个大肠杆菌细胞至少含一个重组质粒 B．每个重组质粒至少含一个限制性核酸内切酶识别位点 C．每个限制性核酸内切酶识别位点至少插入一个ada D．每个插入的ada至少表达一个腺苷酸脱氨酶分子 4．基因工程的正确操作步骤是(　　) ①构建基因表达载体　②将目的基因导入受体细胞　③目的基因的检测与鉴定　④提取目的基因 A．③②④① B．②④①③ C．④①②③ D．③④①② 5．利用苏云金芽孢杆菌的抗虫基因培育的抗虫棉是否成功，最好检测(　　) A．是否有抗生素产生 B．是否有目的基因表达 C．是否有抗虫的性状出现 D．是否能分离到目的基因 6．有关PCR技术的说法，不正确的是(　　) A．PCR是一项在生物体外复制特定的DNA片段的核酸合成技术 B．PCR的原理是DNA双链复制 C．利用PCR获取目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列 D．PCR扩增中必须有解旋酶才能解开双链DNA 7．基因工程中科学家常采用细菌、酵母菌等微生物作为受体细胞，原因是(　　) A．结构简单，操作方便 B．繁殖速度快 C．遗传物质含量少 D．性状稳定，变异少 8．基因工程中不会出现(　　) A．DNA连接酶将黏性末端的碱基连接起来 B．限制酶可用于目的基因的获取 C．目的基因必须由载体导入受体细胞 D．人工合成目的基因不用限制酶 9．基因工程是在DNA分子水平上进行设计施