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半数致死量的测定 实验目的 掌握半数致死量测定的基本方法和寇氏法 的适用条件。 熟悉动物的常用分组方法。 了解寇氏法公式的推导过程。 寇氏法条件： 剂量必须按等比级数（剂量对数按等差级数） 分组。 各组动物数应相等,每组动物数大于组数。 “反应”应大致呈正态分布。最小剂量组的死亡率 （Pn）应为0％，最大剂量组的死亡率（Pm）应为 100％； 当Pn<20%或Pm>80% 需用校正公式计算； 当Pn>20%或Pm<80% 则不能用此法计算。 实验动物 小白鼠 实验药品 不同浓度敌百虫、硝酸银 实验器材 鼠笼、动物天平、1ml注射器、电子计算器 实验步骤 1．预备实验 （1）摸索上下限 即用少量动物逐步摸索出使全部动物死亡的最小剂量(Dm)和一个动物也不死亡的最大剂量(Dn)。观察2～3只动物的死亡情况。如全死，则降低剂量；如全不死，则加大剂量再行摸索，直到找出 Pm=100％和Pn =0％的剂量，此两量分别为上下限。 实验步骤 （2）确定组数，组距及各组剂量 ① 组数：一般5～8组，可根据适宜的组距确定组数， 如先确定5组，若组距过大，可再增加组数以缩小组距。有时也可根据动物死亡情况来决定增减组数。 ② 组距：指相邻两组剂量对数之差，常用“d”来表示。把上下限的剂量换算成对数值，设上限剂量的对数值为Xk，下限剂量的对数值为X1，组数为G则： Xk-X1 d = ──── G-1 实验步骤 ③ 确定各组剂量：由X1逐次加逐d（或Xk逐 次减d），得出各组剂量的对数值，再分别 查反对数：即得出各组剂量（呈等比级数 排列）。 （3）配制等比药液 浓度（%）= 剂量/给药容积 实验步骤 ２．正式实验 （1）实验动物的选择与分组 选择原则：可据不同实验而选取动物，应选择对 被试因素敏感的动物。同时也应考虑动物来源， 经济价值及操作简便等条件。LD50常用小白鼠进 行实验来测得。 分组原则：每组动物数必须多于组数。因为每组 动物数如少于组数，就不能充分反映各组死亡率 的差别。本实验将动物分成7组，每组10只小鼠。 分组方法：按体重，力求各组体重相等。（<5g) 实验步骤 （2）给药、观察死亡数、求出死亡率 给药途径：腹腔注射 给药剂量：0.5ml/20g 给药顺序：同时给药 观察时间：一小时 实验步骤 LD50计算表 结果计算 基本公式 Log LD50 = Xk - d (ΣP-0.5) 式中：XK……死亡率为100%组的对数剂量 d……对数组距 ΣP……各组死亡率之和 校正公式 当Pm>0.8或Pn<0.2时可用下公式计算 ３－Pm－Pn LogLD50 =XK－d（ΣP － ──────） 4 LD50=Log-1LogLD50 思考题 小白鼠如何分组，同学分成几组较为合 适。如何将70只小鼠分给同学。 中毒后能观察到哪些症状。 P(r/n) 死亡率 r n Xi (mg/kg) (%) P(1-P) ∑ 10 2.973 940 3.8 7 10 2.903 800 3.2 6 10 2.833 681 2.7 5 10 2.763 579 2.3 4 10 2.693 493 2.0 3 10 2.623 420 1.7 2 10 2.553 357 1.4 1 死亡数 动