富硒补充剂生物有效率以与生物利用度.ppt

国内现状 另一个方面，1972-1973年间测知黑龙江及陕西省克山病区居民的血和发中硒含量及每日硒摄入量均处于世界罕见的低水平。 总体来说，我国是个缺硒国家， 1982年在《营养学报》上首次公开披露我国72%的地区属于缺硒或低硒地区，2/3 的人口存在不同程度的硒摄入不足。 我国现状 我国人群硒的摄入量为16.28-40.17ug/d，平均36ug/d，低于中国营养协会提出的50-250ug/d的推荐摄入量。2000年李立媛在《富硒食品硒含量标准的探讨》中提出，膳食硒的摄入量在66. 4~ 169ug/ d 时, 血硒水平为人体最佳状态, 即稳定在0.146~ 0.157 ug/ ml 范围内, 低于和高于该摄入量范围,血硒均不够稳定。 富硒补充剂生物有效率以与生物利用度 富硒补充剂生物有效率以与生物利用度富硒补充剂生物有效率以与生物利用度 目录 一、前言 二、背景 三、主要材料 四、技术路线、方法 五、结果 六、结论 前言 硒是一种化学元素，1957 年以前, 微量元素硒是作为毒物进行研究的,1957 年硒首次被证实为动物及人体必需的微量元素后,国内外许多学者已对其进行了广泛的研究，如1973年Rotruck和Flohe等人证实硒是谷胱甘肽的组成部分。 随着研究的深入，各国进而制定了有关硒的RDA，如英国60-75ug/d【2】，然而根据世界卫生组织WHO)和国际粮农组织(FAO)的标准,全球严重缺硒人群(日摄入量7~11μg)达5亿~10亿以上,缺硒人群远远多于硒过量的人群【1】. * 研究背景 食物中的硒浓度取决于土壤中硒的浓度，进而通过食物链影响人体中硒的浓度，因此，人群硒状态呈地理分布。 1984年芬兰实施作物施肥强化硒政策后，到2001年，居民硒的摄入量由之前的38ug/d上升到80ug/d ,表明了强化硒的有效性。 然而，对于比利时这个国家而言，人们更依赖于富硒的膳食补充剂来改善他们的硒状态。 本研究作者将比利时市场上的富硒补充剂归为三大类，通过体外消化模型比较研究三种不同类别的硒补充剂的生物有效性以及生物利用度。 主要实验材料 Se-enriched yeast （167ug/g se)；多维多矿sodium selenate(30ug/g)；多维多矿sodium selenite(35ug/g)；pepsinI; bile salt; Tris; pancreatin; ICP-MS; HPLC; Caco-2 cell ；DMEM; FBS, six-well plate ;HBSS; PE trancewell。 主要材料 ICP-MS: 是电感耦合等离子体质谱仪，主要用途是进行化学元素分析检测，特别是对金属元素分析,检出限比较低。 caco-2细胞，人克隆结肠腺癌细胞，结构和功能类似分化的小肠上皮细胞，可用来模拟体内转运的实验. transewell技术 这是一类有通透性的杯状的装置，根据Corning公司的Transwell说明书中的介绍，可以认为这是一种膜滤器（Membrane filters），也可认为是一种有通透性的支架（permeable supports）。 将Transwell小室放入培养板中，小室内称上室，培养板内称下室，上室内盛装上层培养液，下室内盛装下层培养液，上下层培养液以PET膜相隔。 将细胞种在上室内，上室与下室加入同样的培养基培养细胞直至分化后，上室再加入需要研究的物质的溶液，通过caco-2单层细胞以及滤膜器，进而可以研究该物质的转运吸收。 嵌套的多孔底部使研究者可以从上层或下层接触到细胞，从而为体外的细胞运输和其他代谢活性研究提供通用的工具。 技术路线 公式 方法：硒的分析 50%硝酸微波消化后进入ICP-MS系统测得原始硒的浓度。 酶法提取后进入ICP-MS系统可得到总硒浓度 酶法提取后，进入反相HPLC与ICP-MS联用系统测得原始不同形式硒的浓度（0–5 min 100 % HFBA, 5–10 min 70 % HFBA-30 % methanol） 酶法提取： 方法：胃以及肠内消化 胃内消化：用100ml锥形瓶称量样品，用40mlHBSS稀释(PH=2)，加入2ml胃蛋白酶，充入氮气在无氧状态下37°C,350rpm水浴振摇2h。 肠内消化：用NaHCO3 调整上述得到的消化液的PH到5.3然后加入胆汁以及胰酶，充入氮气37°C,350rpm水浴振摇2h，消化结束后80°C,10min灭活酶类，然后3000rpm离心15min,取上清液进行分析。 方法：细胞培养以及处理 caco-2细胞复苏后，在DMEM培养基培养，并加入10%热灭活FBS以及1%非必须氨基酸，以及200mm谷胱甘肽后，37摄氏度5%二氧化碳孵箱里培养,传代后以细胞