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1、直接涂片镜检:
形态和染色性上有特征的致病菌,直接涂片镜检后有助于初步诊断。
如:痰中查抗酸性杆菌,脓液中找G+葡萄串状球菌等等。
二、致病菌检查程序
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分离培养是微生物学诊断的金标准,是最可靠的传统诊断技术。原则上所有标本均应作分离培养获得纯培养后进一步鉴定,根据不同要求选用不同培养基。
分离培养比直接涂片镜检阳性率高,但需时较久;大多细菌16~24h,结核杆菌需4~8W。
2、分离培养:
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3、生化试验:
是鉴定细菌的重要方法之一
针对一个菌落或纯培养物进行鉴定
Sugar Fermentation
H2S Test
VITEK细菌自动鉴定系统
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用含有已知的特异性抗体检测标本中或分离培养物中未知的细菌,以确定致病菌的种或型;
是临床细菌性疾病诊断和病原菌鉴定的重要手段之一。
4、抗原检查:
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常用有玻片凝集试验,简单易行且特异性强。尚有免疫荧光、酶免疫、协同凝集、乳胶凝集等试验,优点:快速、灵敏且不受抗生素等药物影响。
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主要用于分离致病菌,测定菌株产毒性和科研等。
常用动物:小鼠、豚鼠、家兔
接种途径:皮内、皮下、腹腔、肌肉、静脉、脑内等。
5、动物试验:
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测定标本中致病菌对药物的敏感程度,对指导临床用药、及时治疗及控制感染有重要意义。
常用纸片法和试管稀释法。
6、药物敏感试验:
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金黄色葡萄球菌的药敏试验
大肠埃希菌的药敏试验
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核酸杂交技术
PCR技术
DNA指纹或图谱
DNA芯片技术
7、核酸检测:
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致病菌的检验程序
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病原菌刺激免疫系统发生免疫应答产生特异性抗体。抗体的量常随感染过程而增多,表现为效价(titer)或称滴度的升高。
用已知的细菌或其特异性抗原检测患者体液中有无相应抗体及其效价的动态变化,可作为某些传染病的辅助诊断。
第二节 血 清 学 诊 断
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结 果:
以抗体效价明显高于正常人水平或患者恢复期抗体效价比急性期升高≥4倍方有意义。
种 类:
常用有直接凝集实验、沉淀实验、补体结合实验、中和试验、ELISA等。
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人为地将疫苗或类毒素等免疫原接种于人体,使机体主动产生特异性免疫力的措施, 主要用于某些传染病的预防。
第三节 人工主动免疫
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1)灭活疫苗:
又称死疫苗选用免疫原性强的病原体经人工大量培养后,用理化方法杀死而成;如伤寒、百日咳、霍乱等疫苗。
优点:易于制备和保存。
缺点:接种剂量大;维持时间短;接种
次数多;注射的局部和全身性副
反应较大;不产生细胞免疫应答。
1、疫苗(vaccine)
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用减毒或无毒力的活病原体制成;如BCG。
优点:只需接种一次、接种剂量较小、 免疫效果好且持久、能同时产生细胞免疫和体液免疫;以自然途径接种,有SIgA抗体的局部粘膜免疫形成。
缺点:不易保存(冷藏且保存期短)、
回复毒力的危险性
2)减毒活疫苗:
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3)亚单位疫苗
由细菌主要保护性免疫原组成的疫苗称为亚单位疫苗。如肺炎球菌、脑膜炎球菌的荚膜多糖,钩端螺旋体的外膜蛋白等。
4)核 酸 疫 苗
5)DNA重组疫苗
6)治疗性疫苗
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外毒素经0.3~0.4%甲醛作用3~4周后,毒性消失仍保持免疫原性的制品。
如:白百破三联疫苗(DPT)是将白喉类毒素、百日咳死菌苗、破伤风类毒素混合而成。
2、类毒素:
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注射含有特异性抗体的免疫血清或纯化免疫球蛋白抗体,或细胞因子等细胞免疫制剂,使机体即刻获得特异性免疫力的过程。
作用:治疗或紧急预防。
第四节 人工被动免疫
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一般多用细菌类毒素或外毒素多次免疫动物,分离血清提取其免疫球蛋白精制成抗毒素制剂,能中和外毒素;
如白喉抗毒素、TAT。使用时应先进行皮肤过敏试验。
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