蝎毒抗 癌多肽的肿瘤抑制作用研究.pdf

t…，，…～■，-●十，-‘?。。‘o’4’‘’’’’4一’￡螺嫩差魁裂磐……………， 蝎毒抗癌多肚的肿瘤抑制作用研究(中文摘要) 一、APBMV孓,-I肿瘤的抑制作用． j实验中使用的AIt，BMV由河南医科大学生物毒素中心提供。 、 f一1面BMVi,t体外培养的人肿瘤细胞的作用 1、APBMV对肿瘤细胞生长的抑制作用 184、 本实验采用8{oo人肿瘤细胞株，包括：Ecal09、Hep一2、C1 HL．60、SMMC．772 44 对它们的影响。实验分为空白对照组、阳性对照组和APBMV 观察指标：①细胞毒性实验(MTT法)；②细胞生长抑制实验(台盼 蓝拒染法)；③集落形成实验；④细胞分裂指数(MI)观察。 实验结采表明：①APBMV对人肿瘤细胞的毒性作用：APBMV 处理上述8种肿瘤细胞24～7212或更长时间后，除Hela细胞外，其 余7,co细胞代谢MTT的能力下降，均显示明显的毒性反应，并有 较好的剂量效应关系：APBMV最高剂量时的细胞生长抑制率达 胞中较低的，分别为57．44％5f116884％，CNE．2Z细胞的生长抑制 有生长抑制作用：APBMV处理5种人肿瘤细胞(Ecal09、Hep．2、 药物浓度的升高和作用时问的延长而减少，APBMV 1699／ml、处 理细胞72h后，细胞生长抑制率fIR)高达70．85％(C1184)～96．49％ (Hep2)；剂量效应和时间效应显著，IC50的浓度范围在新药研究 规定的有效范围之内：③APBMV对细胞集落形成能力的抑制作 昱生曼型态兰曼去芰芝篓老——塑麦蒸妻耋鐾盟!!瘪搜型堡曼要塞I妻亳!曼：。 184和 formation 浓度的增高而升高，亦有明显的剂量效应关系，APBMV最高剂 量处理细胞后，上述4种细胞的艰分别为65．74％、89．94％、46．03％ index，MI)的影响：APBMV 和70．92％；④对细胞分裂指数(mitosis 184细胞Ⅶ下降，APBMV最高剂量时Hep一2细胞 可使Hep．2和C1 的~Ⅱ值是1 184细胞的MI值是9．04 5．02％0(对照组47．50／oo，p0．01)，C1 应关系：@APBMV对Hela细胞的作用不明显。 2、APBMV抑制肿瘤细胞生长机制的观察 采用流式细胞仪双标法和玻璃微电极细胞内纪录法，观察 APBMV对CNE．2Z细胞周期、P53基因的表达以及细胞膜电位的 影响。实验仍分为空白对照、阳性对照以及APBMV的4个浓度组 和48h。 实验结果：①APBMV对CNE．2Z细胞周期移行的影响： CNE．2Z细胞经不同浓度的APBMV处理48h后，进入S期的细胞明 显减少，处于G1期和G2期的细胞明显增多，APBMV 16p,g／ml处 理CNE．2Z细胞48h后，G1期、S期和G2期细胞的百分比分别为： 59．7％、32．3％和7．9％，对照组G1期、S期和G2期细胞的百分比分 别为：53 3％、45．2％和1．5％，二者相比较，差异极显著(p0．01 期百分比变化不明显。②APBMV对CNE．2Z细胞抑癌基因p53表 达的影响：未经任何因素处理的CNE．2Z细胞中p53基因的表达量 主苎堡!!态姜鐾去鬟篡篓老～——…。塑耋夔登老壁墅!!罂塑i!生曼要塞!塞i芝堡L 处于较高水平(27．23+0．93和3 后，口53蛋白的表达量明显下降，分别为18．31±0．79．乖n19．57±1．35， 与对照组相比有极显著差异p0．001)；③APBMV对细胞膜电位 58mV，对照：23±8．21mV)，细胞膜呈去极化状态。