微量元素对维生素E的荧光光谱的影响研究.doc

PAGE PAGE 10 微量元素对维生素E的荧光光谱的影响研究 1 序言 维生素是我们人体不可或缺的物质，具有保持机体健康和维持机体正常代谢的生理功能。维生素E，又名抗不育生素。维生素E具有很高的抗氧化作用，是高效的抗氧化剂，能使体内细胞避免自由基的损害，具有维持细胞膜的完整、防止脂质过氧化等生理功能；还有研究表明维生素E能够替代硒，能够提高人体免疫力的作用，另外还可以对肿瘤生长起到抑制的作用[1]。另外到目前为止，在油脂类食品中，它也是唯一无毒的天然抗氧化剂[2]。它在植物中主要存在与植物油料中，在动物中主要存在于脂肪以及器脏中。 维生素E的分子结构（C29H50O2） 测定维生素E的方法主要有高效液相色谱法、、比色法以及荧光法等。虽然比色法操作相对与其他方法比较简单，但因为其灵敏度不高而不被广泛使用；高效液相色谱法虽然灵敏度非常高，但它操作复杂，且所需费用也高，对测定大量样品时比较困难；用荧光法测定维生素E时，其具有针对性强，检出限低，干扰少，简便、快速等特点[3]。由于维生素E的含有苯环结构，并且具有共轭双键体系，在共轭双键内的p电子可激发，因此具有荧光。又因为维生素E的荧光强度和其含量成正比关系，所以，可根据溶液的荧光强度得出维生素E的含量。在现代色谱技术还没有普遍应用之前，测量维生素E的主要方法就是荧光法[4]。 Dugganlls和Hansse首先提出以荧光法测定维生素E，并将其应用于组织以及血清样品中维生素E含量的分析。1995年，美国学者Duggan[5]，在特定波长下（激发波长和发射波长分别是295nm和340nm），测定了组织中和血液中的醋酸酯和血液中维生素E的含量，他使用的发法与传统的比色法相比，此法不仅灵敏度高、方便操作、抗干扰、特异性强、环境友好型，且得出最低检测限比比色法高出一个数量级，能达到0.005ug/ml。国内的俞巧玲等[6]等用荧光法测定出了饲料以及食品中维生素E的含量，她指出，皂化对测定维生素E的准确性影响很大，测定出的结果和薄层色谱法测定结果一致。而阚健全[7]也在特定波长（激发波长295nm，发射波长340nm）下，快速测定了食品中维生素E的含量，测定的结果与比色法相比基本一致，得出的线性范围是0.05-10ug/ml。邵晓芬等[8]用石油醚来做萃取剂和提取剂，在含有维生素E的乙醇介质中，为避免维生素E被氧化，用硫酸来抑制维生素A对维生素E的干扰作用，使样品不需要经过充氮、柱分离，便能利用荧光法同时测定出饲料以及食品中的维生素A和维生素E，实验结果也非常满意。冯彦博[9]则利用荧光法，先使样品皂化，后将不皂化物溶于正己烷中，在激发波长和发射波长分别是295nm和324nm下测定其荧光强度，在与标准维生素E相比较，测其样品中维生素E含量，测得结果表明在黄粉虫中含有丰富的维生素E。 陈家华[10]通过实验表明，用荧光法来测定维生素E的时候，样品的前期处理过程会对分析结果造成很大影响，并用正交试验表明最关键的步骤是前期的皂化提纯，并得出了准确测定样品中维生素E含量的最佳皂化和最佳萃取条件。悠良清[11]则用己烷作溶剂，在Ex=265nm、Em=325nm下，准确测定了在茶叶中维生素E的含量，测得线性范围达到128-343ug/ml，而回收率达到96%一100%。周松[12]用日立850型荧光分光光度计得出了在一定范围内维生素E的荧光强度与其浓度成正比线性关系，它的线性回归方程为y=0.057+0.227x（R=0.999）。他采用正交实验法探讨了食物和饲料中测定维生素E的各种条件，在特定波长下测定了维生素E，最后测定瓜果蔬菜等食品中维生素E含量时，取得了较好的结果，并在精密度测试中，实验结果也是非常不错。段俊红[13]等通过实验，在37℃ 本实验主要探究了在维生素E的乙醇溶液中，不同微量元素（钙、镁、铜、锌、铁离子）对维生素E的荧光强度的增强或猝灭作用，通过荧光强度的变化值△F,可根据线性关系可简单、快捷的计算出溶液中微量元素的含量。 2 实验部分 2.1实验仪器 实验仪器见表1。 表1 实验仪器 2.2 试验试剂 含量为97.7%的维生素E标准液，中国食品药品检定研究院 溶解准确称取的0.0069g维生素E标准液，在容量瓶（25ml）中进行定容，即可得到浓度为0.267mg/ml的维生素E的乙醇储备液。 微量金属离子溶液： Ca2+溶液，取11.0997g的无水CaCl2，将其溶解定容于100ml的容量瓶中，配制成1mol/L的储备液； Mg2+溶液，取20.3300g的MgCl2，按上述方法配制成1mol/L的Mg2+储备液； Cu2+溶液，取24.9698g的CuSO4.5H2O，按上述方法配制成1mol/L的Cu2+储备液； Zn2+溶液，取13.6293g的ZnCl2，