小鼠真核表达质粒pcDNA31FGFR1的构建及表达（临床医学资料）.doc

小鼠真核表达质粒pcDNA31FGFR1的构建及表达（临床医学资料） 文档信息 属性： F-01NHT4，doc格式，正文24093字。质优实惠，欢迎下载！ 适用： 作为医学资料、临床医学资料写作的参考文献，解决如何写好实用应用文、正确编写文案格式、内容摘取等相关工作。 目录 TOC \o "1-9" \h \z \u 目录 1 正文 1 文1：小鼠真核表达质粒pcDNA31FGFR1的构建及表达 2 1 材料与方法 3 2 结果 5 3 讨论 5 文2：IL18PE38真核表达质粒的构建及表达 6 1 材料和方法 7 2 结果 8 3 讨论 9 参考文摘引言： 11 原创性声明（模板） 12 文章致谢（模板） 12 正文 小鼠真核表达质粒pcDNA31FGFR1的构建及表达（临床医学资料） 文1：小鼠真核表达质粒pcDNA31FGFR1的构建及表达 View from specialist: It is creative, and of certain scientific and educational value. [ABSTRACT] Objective: To cotruct a recombinant eukaryotic expression plasmid (+)FGFR1, and detect its expression in the cell of CHO. Methods: The fulllength gene of murine FGFR1 was amplificated by PCR, and then was ierted into the eukaryotic expression plasmid (+). After the recombinant plasmid was confirmed by restriction endonuclease analysed and sequencing test, it was trafected into eukaryotic cell CHO by lipofectin. The FGFR1 protein was explored by Western blot. Results: The cotructed recombinant plasmid contained the sequence of FGFR1 gene. After trafection with the plasmid, FGFR1 protein can be expressed in CHO cells. Conclusion: The cotructed eukaryotic expression plasmid (+)FGFR1 can effectively express FGFR1 protein in vitro. [KEY WORDS] Fibroblast growth factor receptor1 (FGFR1); Eukaryotic expression plasmid; Genetic engineering 现已证实，实体肿瘤的生长与转移必须依赖于血管生成[1,2]。碱性成纤维细胞生长因子1型受体(fibroblast growth factor receptor1，FGFR1)是最重要的肿瘤血管生成调节因子之一，其主要通过与高亲和性配体bFGF结合后发生二聚体化导致自身磷酸化，从而诱导肿瘤血管生成，进而促使肿瘤细胞增生和转移[3-5]。 可见，FGFR1/bFGF信号传导通路在肿瘤血管生成中扮演着重要作用。许多研究表明，利用DNA核酸疫苗可以诱导产生交叉免疫反应抗肿瘤血管生成[6-8]。我们新近研究也证实，以FGFR1基因为靶点的生物 治疗 可以抑制肿瘤血管生成达到治疗肿瘤的目的[9-11]。因此，本研究拟利用基因工程技术构建小鼠FGFR1真核表达载体，为后继研究FGFR1的医学应用奠定基础。 1 材料与方法 材料 质粒和宿主菌 真核表达质粒pcDNA (+) 购自 Invitrogen公司，宿主大肠埃希杆菌E. coli DH5α和CHO 细胞株为本实验室保存。 酶类及试剂 Trizol、转染试剂盒LipofectamineTM2000 购自Invitrogen 公司，一步法RTPCR试剂盒、DNA marker、限制性内切酶和T4 噬菌体DNA 连接酶购自TaKaRa公司，胎牛血清购自Gibcol 公司，辣根过氧化物酶标记的兔抗小鼠IgG 购自Santa Cruz 公司。 方法 目的基因片段的体外扩增 根据GenBank