核酸提取试剂（磁珠法）使用说明书.pdf

济凡生物科技 （常州）有限公司 版本号：FML1714 核酸提取试剂 （磁珠法）使用说明书 【产品名称】 通用名称：核酸提取试剂 （磁珠法） 【包装规格】103-Y 型：10 次/盒，16 次/盒，32 次/盒，40 次/盒，48次/盒，64 次/盒，96 次/盒。103-B 型： 50 次/盒，96 次/盒，960 次/盒。 【预期用途】用于核酸的提取、富集、纯化等步骤。其处理后的产物用于临床体外检测使用。 【检验原理】含有靶核酸的待分离样品经裂解液裂解细胞后，利用磁珠与DNA 分子特异性地识别和高效 结合，并利用磁性分离器使磁珠吸附于管壁，通过洗涤、洗脱、纯化过程得到高纯度的DNA。 【主要组成成份】主要由裂解液、漂洗液、洗脱液、磁珠等组成。 【储存条件及有效期】试剂盒中所有组分可在室温 （15-25）℃干燥条件下保存 12 个月。 【适用仪器】 1. 手工法 (1) 恒温混匀仪 (2)2ml磁力架——货号：T02 (3) 无水乙醇 2. 自动法 (1) 32 —— P32 适配 通道提取仪 货号： 若使用单条试剂，需配备单样本提取底座——PB01 (2) 96 —— P96 适配 通道提取仪 货号： 【样本要求】血液 【检验方法】 表1. 根据目录号选择对应检测方法 目录号 M103 Y103-G10 Y103-G10-S Y103-G30 适用检测方法 方法一 （手工法） 方法二 （自动法） 方法二 （自动法） 方法三 （自动法） 方法一：手工法 1. 取200 μl 血液样本至2ml 离心管中。 2. 依次加入600 μlBuffer GL 和20 μlProteinaseK。56 ℃加热孵育10min，每5min 震荡混匀2min。 3. 再加入30 μl 磁珠F，56 ℃加热孵育10min，每5min 震荡混匀2min。 注意：为了确保磁珠彻底重悬，请在使用前彻底震荡混匀。 4. 将离心管放置于磁力架上静置30 sec，磁珠完全吸附后，小心吸弃液体。 5. 加入700 μlBuffer DW，震荡混匀2min。 6. 将离心管放置于磁力架上静置30 sec，磁珠完全吸附后，小心吸弃液体。 7. 再次加入700 μlBuffer DW，震荡混匀3min。 8. 将离心管放置于磁力架上静置30 sec，磁珠完全吸附后，小心吸弃液体。 9. 将离心管从磁力架上取下，加入700 μl 75%乙醇 （自备），震荡混匀2min。 10. 将离心管放置于磁力架上静置30 sec，磁珠完全吸附后，小心吸弃液体。 1 济凡生物科技 （常州）有限公司 11. 将离心管放置于磁力架上，室温晾干 10-15min。 注意：乙醇残留会抑制后续的酶反应，所以晾干时要确保乙醇挥发干净。但也不要干燥太长时间，以 免难以洗脱DNA。 12. 将离心管从磁力架上取下，加入80 μlRNaseFreeddH O洗脱，震荡混匀，65℃孵育10min，每5min 2 震荡一次，每次震荡2min。 13. 将离心管放置于磁力架上静置2min，磁珠完全吸附后，小心将DNA 溶液转移至一个新离心管中，适 当条件保存。 方法二：自动法 （配适32 通道核酸纯化仪） 1. 取出预封装深孔板或单条试剂，颠倒混匀数次使磁珠重悬，轻甩孔板使试剂及磁珠均集中到孔板底 部 （也可使用孔板离心机，500rpm×1min 进行离心），使用前小心撕去铝箔封口膜，避免孔板振 动，防止液体溅出。 2. 2 8 200 μl 20 μlProteinaseK 96 96 在第 、 列中加入 样品和 ，将 孔板放置于自动