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普通生物学详解演示文稿;优选普通生物学; PCR技术：1985年由美国 Cetus 公司的Kary Mullis 首创，可以将微量目的DNA片段扩增一百万倍以上。 优点：敏感度高、特异性强、产率高、重复性好以及快速简便等 Kary Mullis 本人因此获1993年诺贝尔化学奖 ;PCR的原理： 用于扩增位于两段已知序列之间的DNA片段，类似于天然DNA的复制过程。 以拟扩增的DNA分子为模板，以一对分别与模板5′末端和3′末端互补的寡核苷酸片段为引物，在DNA聚合酶的作用下，按照半保留复制的机制沿着模板链延伸直至完成新的DNA合成，重复这一过程，即可使目的DNA片段得到扩增。 ;试管中进行的DNA复制反应，依据 DNA半保留复制的机理； 体外DNA分子于不同温度下可变性和复性的性质； 通过人为控制体外合成系统的温度，使 双链DNA变成单链， 单链DNA与人工合成的引物退火， DNA聚合酶使引物沿着单链模板延伸为双链DNA。 ; 扩增的特异性取决于引物与模板DNA的特异结合，基本反应步骤分三步： 1. 变性 (Denaturation)： 加热使模板DNA双链间的氢键断裂而形成两条单链。94℃ 30″ 2. 退火 (复性) (Annealling): 突然降温后模板DNA与引物按碱基配对原则互补结合，也存在两条模板链之间的结合，但由于引物的高浓度，结构简单的特点，主要的结合发生在模板与引物之间。55 ℃ 30 ″; 3. 延伸 (Extension): 将反应温度调节到酶的最适温度，在DNA聚合酶、4种 dNTPs 及镁离子等存在的条件下，以引物的 3′ 端开始，结合单核苷酸，形成与模板链互补的新DNA链。72 ℃ 1′ 上述 3 步为一个循环，每经过一个循环，样本中的DNA量应该增加一倍，新形成的链又可成为新一轮循环的模板，经过25～40个循环后DNA可扩增106 ～ 109 倍。; PCR 的基本反应步骤;;;高温变性;低温退火;中温延伸;;;;;;;;;;;;水解DNA分子骨架的磷酸二酯键，将一个完整的DNA分子切割成若干片段，如同一把基因操作的“手术刀”;限制性核酸内切酶 能够识别DNA上的特定碱基序列并从这个位点切开DNA分子。 第一个核酸内切酶EcoRI是Boyer实验室在1972年发现的，它能特异性识别GAATTC序列，将双链DNA分子在这个位点切开并产生具有粘性末端的小片段。 ;几种主要DNA内切酶所识别的序列及其酶切末端。;基因克隆的载体;载体三要素： 自我复制能力； 携带外源基因片段大小（具有较小的分子量和较高的拷贝数）； 插入位点多少（具有若干限制酶单一识别位点）； 易于鉴定识别（具有抗菌素抗性基因）;*;*;DNA连接酶能把不同的DNA片段连接成一个整体 ;重组DNA操作过程示意图;*;（一）动物是由多层次的结构组成的 ;1 上皮组织(epithelial tissue)：覆盖在身体及其部分的表面上;功能;2 结缔组织（connective tissue)： 联结与支持其他的组织，由间质和分散其中的细胞构成。 特点： 形式多样，分布广泛 功能： 连接、支持、 保护、防御 ;结缔组织类型:;固有结缔组织: 2.1 疏松结缔组织（loose connective tissue) 组成： 由少量、多种细胞和大量细胞间质构成。 分布： 全身各种细胞、 组织和器官之间 功能： 支持、连接、防御、 保护和营养、修复;2.2 致密结缔组织(dense connective tissue);2.3 脂肪组织(adipose tissue);概念： 血液是一种特化了的液态结缔组织，由 血浆和血细胞组成，占体重的7％～8％ 加入抗凝剂沉淀后，分为三层： 上层淡黄色的液体为血浆； 中层薄层灰白色为白细胞和血小板； 下层红色为红细胞。 功能： 传输物质和免疫;软骨和骨;膜性骨发生简图;*;*;软骨化骨示意图;3 肌肉组织：在动物的运动中发挥作用 ?构成： 由成束的具有收缩能力的长形肌纤维（细胞）构成，是脊椎动物体内最丰富的组织。 ?功能： 维持机体和器官的运动。 ;分类: 骨骼肌（随意肌） ： 有明显的横纹， 多核， 受躯体神经支配; 心肌(不随意肌) ： 有横纹、单核或双核， 有闰盘， 受植物性神经支配;