微生物的实验室培养.pptx

课题1 微生物的实验室培养专题2:微生物的培养与应用一、基础知识（一）微生物的类群原核类:细菌、支原体、放线菌、蓝藻原生生物：显微藻类、原生生物微生物真核类酵母菌、霉菌、食用菌真 菌：非细胞类：病毒、类病毒、朊病毒◆微生物的共同特点：个体微小、结构简单1.细菌的形态2.细菌的繁殖二分裂3.细菌的菌落 （1）概念： 单个或少数细菌在固体培养基上 大量繁殖时，形成的一个肉眼可见的、具有一定形态结构的子细胞群体，叫做菌落。大小、形状、光泽度、颜色、硬度、透明度等。（2）特征：（3）功能：每种细菌在一定条件下所形成的菌落，可以作为菌种鉴定的重要依据。几种菌落及其形态几种菌落及其形态4.病毒的结构:由核酸和蛋白质构成病毒的结构（二）微生物需要的营养物质及功能1.碳源 2.氮源 3.无机盐 4.水 5.特殊营养物质1.碳源⑴概念：凡是能为微生物提供碳元素的营养物质。①无机碳源：CO2；NaHCO3等⑵来源：②有机碳源：糖类、脂肪酸、石油等⑶作用：①构成细胞物质和一些代谢产物②异养微生物的能源2.氮源⑴概念：凡是能够为微生物提供N元素的营养物质。①无机氮源：N2、NH4+、NO3-、NH3等。⑵来源：②有机氮源：尿素、牛肉膏、蛋白胨、 氨基酸等主要用于合成蛋白质、核酸及含N的代谢产物。⑶作用：3.特殊营养物质（生长因子）⑴概念：微生物生长不可缺少的微量有机物。⑵作用：酶和核酸的组成成分。⑶常见的生长因子：维生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等。（三）培养基 1.概念 ：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。2.培养基的类型和用途3.不同培养基配方(参考教材附录3) 4.不管哪种培养基，一般都含有水、碳源、氮源、无机盐等营养物质，另外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质（如:生长因子）以及氧气、二氧化碳、渗透压等的要求。 培养基的种类划分标准培养基种类特点用途物理性质化学成分用途液体培养基不加凝固剂工业生产观察微生物的运动、分类鉴定半固体培养基加凝固剂，如琼脂微生物分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种固体培养基天然培养基含化学成分不明确的天然物质工业生产合成培养基培养基成分明确分类、鉴定在培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物的生长,促进所需要的微生物的生长培养、分离出特定微生物选择培养基在培养基中加入某种指示剂或化学药品,用以鉴别不同种类的微生物鉴别不同种类微生物鉴别培养基液体培养基：表面生长均匀混浊生长沉淀生长半固体培养基：固体培养基：菌落无动力有动力(弥散)back(是否运动) （四）无菌技术1.概念 无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。2.消毒与灭菌 ⑴消毒定义： 利用化学或物理方法，杀死部分微生物的过程。⑵灭菌的定义：　以化学试剂或物理方法消灭所有微生物，包括所有细菌的繁殖体、芽孢、霉菌及病毒，而达到完全无菌之过程。 3.常用的消毒与灭菌的方法（1）消毒的方法①煮 沸 消 毒 法： 100℃煮沸5-6min。②巴 氏 消 毒 法：70-75℃下煮30min或 80℃下煮15min。③化学药剂消毒法：用70%酒精等进行皮肤 消 毒；氯气消毒水源。④紫 外 线 消 毒 法（2）灭菌的方法①灼烧灭菌②干热灭菌 160-170 ℃下加热1-2h。③高压蒸气灭菌 100kPa、121 ℃下维持15-30min. 最常用的灭菌方法是________________，它可以杀灭所有的生物，同时可以基本保持培养基的营养成分不被破坏。 有些玻璃器皿也可采用______________。为了防止杂菌，特别是空气中的杂菌污染，试管及玻璃烧瓶都需采用适宜的塞子塞口，通常采用_______，也可采用各种金属、塑料及硅胶帽，它们只可让空气通过，而空气中的其他微生物不能通过。 平皿是由正反两平面板互扣而成，这种器具是专为防止空气中微生物的污染而设计的。 高压蒸汽灭菌高温干热灭菌棉花塞旁栏思考旁栏思考 1.无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外,还有什么目的？无菌技术还能有效避免操作者自身被微生物感染。2.请你判断以下材料或用具是否需要消毒或灭菌。如果需要，请选择合适的方法。（1） 培养细菌用的培养基与培养皿（2） 玻棒、试管、烧瓶和吸管（3） 实验操作者的双手 灭菌消毒微生物实验室培养的基本操作程序1.器具的灭菌2.培养基的配制3.培养基的灭菌4.倒平板5.微生物接种6.恒温箱中培养7.菌种的保存二、实验操作(以培养大肠杆菌为例)（一）制备牛肉膏蛋白胨培养基1.计算2.称量3.溶化4.灭菌: 将锥形瓶放入高压蒸气灭菌锅，在压力为100kPa、温度为121℃，灭菌15～30min。5.倒平板: 待培养基冷却到5