Trim9调控视网膜Müller细胞向神经节细胞定向分化_NormalPdf.docx

2023,48(10)

2023,48(10)

1561JCentSouthUniv(MedSci)

1561

DOI：10.11817/j.issn.1672-7347.2023.230108

Trim9调控视网膜Müller细胞向神经节细胞定向分化

李金香，曾琦

[湖南师范大学第一附属医院(湖南省人民医院)眼科，长沙410005]

[摘要]目的：青光眼是不可逆性致盲性眼病的主要病因，目前尚无有效疗法逆转青光眼的视觉系统损害。最近发现干细胞疗法有望使受损的视网膜神经元修复和再生，但是在干细胞来源方面仍然存在较大挑战。本研究探寻一种将视网膜Müller细胞去分化为视网膜干细胞，进一步高效定向分化为视网膜神经节细胞的方案，以期为青光眼的干细胞治疗提供新的细胞获取途径。方法：用表皮细胞生长因子和成纤维细胞生长因子2诱导大鼠视网膜Müller细胞去分化为视网膜干细胞。构建Trim9过表达慢病毒(PGC-FU-Trim9-GFP)，感染由Müller细胞诱导去分化而来的视网膜干细胞，通过荧光显微镜观察和流式细胞术评估病毒感染效率。用视黄酸和脑源性神经营养因子处理过表达或未过表达Trim9的视网膜干细胞以诱导其分化为神经元和神经胶质细胞。采用免疫荧光、PCR/real-timeRT-PCR和蛋白质印迹法检测各细胞标志物(GLAST、GS、rhodopsin、PKC、HPC-1、Calbindin、Thy1.1、Brn-3b、Nestin、Pax6)的表达。结果：表皮细胞生长因子和成纤维细胞生长因子2处理后的大鼠视网膜Müller细胞表达视网膜干细胞标志物Nestin和Pax6。视黄酸和脑源性神经营养因子处理后的过表达Trim9的视网膜干细胞Thy1.1阳性细胞明显增多，表明其定向分化为视网膜神经节细胞。结论：本研究成功将大鼠视网膜Müller细胞去分化为视网膜干细胞，并发现Trim9可有效促进由视网膜Müller细胞去分化而来的视网膜干细胞定向分化为视网膜神经节细胞。

[关键词]青光眼；Müller细胞；Trim9；视网膜干细胞；视网膜神经节细胞

Trim9regulatesthedirectionaldifferentiationofretinalMüllercellstoretinalganglioncells

LIJinxiang,ZENGQi

[DepartmentofOphthalmology,FirstHospitalAffiliatedwithHunanNormalUniversity(HunanProvincialPeople，sHospital),Changsha410005,China]

ABSTRACTObjective:Glaucomaisaleadingcauseofirreversibleblindness,andeffectivetherapiestoreversethevisualsystemdamagecausedbyglaucomaarestilllacking.Recently,thestemcelltherapyenabletherepairandregenerationofthedamagedretinalneurons,butchallengesregardingthesourceofstemcellsremain.Thisstudyaimstoinvestigatea

ABSTRACT

收稿日期(Dateofreception)：2023-03-15

第一作者(Firstauthor)：李金香，Email:lijx184@163.com,ORCID:0009-0003-0264-650X

通信作者(Correspondingauthor)：曾琦，Email:zengqi1216@,ORCID:0000-0001-9921-1024

基金项目(Foundationitem)：湖南省卫生健康委员会科研计划项目；湖南省自然科学基金(2021JJ30397)；湖南省科技厅重点研发项目(2020SK2119)。ThisworkwassupportedbytheScientific