常见性病实验室检测原理方法.ppt

*************二、淋病第32页,共59页，2024年2月25日，星期天常用淋病检测方法直接显微镜检查分离培养淋球菌第33页,共59页，2024年2月25日，星期天直接显微镜检查原理：男性淋菌性尿道炎患者常有大量黄白色脓性分泌物，其多形核白细胞内可找到革兰染色阴性的双球菌。方法：革兰染色为一传统方法，革兰染色将菌分为二大类，即染成紫色的革兰阳性菌及染成红色的革兰阴性菌。第34页,共59页，2024年2月25日，星期天直接显微镜检查的临床意义男性淋菌性尿道炎的尿道标本敏感性及特异性可高达95%～99%，具诊断价值。宫颈标本、无症状男性尿拭子及取自直肠的涂片时敏感性仅40～70%。不推荐直接显微镜检查诊断直肠和咽部淋球菌感染。亦不能用于疗后判愈。如果在多形核细胞外见到形态典型的革兰阴性双球菌，需做培养进行确证。第35页,共59页，2024年2月25日，星期天淋球菌培养1．原理：淋球菌在适宜的培养基上可生长出特征性的菌落，根据菌落大小、形态、光泽、边缘、颜色等情况，可以作为淋球菌的鉴定依据之一。2、方法特点：敏感性81~100%。特异性100%—第36页,共59页，2024年2月25日，星期天淋球菌培养培养条件：35℃～36℃，含5%～10%CO2，湿润（70%湿度）的环境。CO2环境可由CO2培养箱、CO2产气袋及烛缸提供。使用烛缸时，应使用白色、无芳香味的无毒性蜡烛。在烛缸底部放些浸水棉球以保持一定的湿度。培养时间：24~48小时第37页,共59页，2024年2月25日，星期天淋球菌的初步鉴定初步鉴定淋球菌的依据菌落特征氧化酶试验革兰染色第38页,共59页，2024年2月25日，星期天淋球菌培养的临床意义培养法为诊断淋病的金标准.用于女性感染者、亚临床感染者、以及来自直肠和咽部的感染的确诊试验。第39页,共59页，2024年2月25日，星期天生殖道沙眼衣原体感染第40页,共59页，2024年2月25日，星期天生殖道沙眼衣原体感染简介50年代80年代梅毒淋病软下疳性病性淋巴肉芽肿梅毒淋病软下疳性病性淋巴肉芽肿非淋菌性尿道炎生殖器疱疹尖锐湿疣HIV/AIDS2007年后梅毒淋病生殖道沙眼衣原体感染生殖器疱疹尖锐湿疣HIV/AIDS第41页,共59页，2024年2月25日，星期天常用生殖道衣原体感染检测方法抗原检测酶联免疫吸附试验（ELISA）免疫层析快速检测核酸检测第42页,共59页，2024年2月25日，星期天酶联免疫吸附试验1、原理：于衣原体特异性单克隆抗体形成抗原抗体复合物，通过酶联显色反应检测衣原体抗原。2、方法特点敏感性：79－97％特异性:97－99％试验结果阴性时，不能完全排除沙眼衣原体感染，有可能是沙眼衣原体数量不足或标本采集不当的缘故第43页,共59页，2024年2月25日，星期天结果判读客观性强，适宜于大样本沙眼衣原体感染的检测。在沙眼衣原体高流行率的人群临床和健康体检；低流行率（小于5%）的人群中应用时，结果解释应慎重。酶联免疫吸附试验临床意义第44页,共59页，2024年2月25日，星期天抗原快速检测1、原理：利用免疫层析法原理，采用胶体金标记的沙眼衣原体抗体滤纸条或卡，快速检测标本中的沙眼衣原体抗原。2、方法特点简易，方便，快速，尤其适用于基层单位标本中需要足够数量的沙眼衣原体抗原，否则有假阴性结果第45页,共59页，2024年2月25日，星期天抗原快速检测临床意义该方法主要适用于女性患者宫颈标本的检测，敏感性较低。该法快速、简便，无需特殊仪器，因此，较适合基层实验室开展。第46页,共59页，2024年2月25日，星期天核酸扩增检测1、原理：核酸扩增技术是通过扩增沙眼衣原体的多拷贝基因（如隐蔽性质粒、染色体和RNA）检测病原体。2、方法包括聚合酶链反应（PCR）、连接酶链反应（LCR）、等温链置换扩增技术（SDA）、转录介导扩增技术（TMA）等。目前国内广泛使用的有实时荧光PCR。第47页,共59页，2024年2月25日，星期天核酸扩增检测临床意义核酸扩增检测具有很高的敏感性和特异性，世界卫生组织已推荐为扩大的生殖道沙眼衣原体感染实验室诊断的“金标准”。核酸扩增检测不仅可用于宫颈、尿道标本中沙眼衣原体的检测，也可用于男女性尿液标本的检测。开展核酸检测的实验室应通过有关部门考核取得开展临床核酸检测技术资格证。第48页