8-2 水体氨氮的测定-纳氏试剂分光光度法-教学课件.ppt

水质监控技术--水质监控技术课程组

养殖水质氨氮的检测与调控《水质监控技术》课程养殖水质氨氮的测定-纳氏试剂分光光度法

学习目标能够正确的进行水质氨氮的测定。学习目标.学习目标.掌握纳氏试剂分光光度法测定氨氮的原理及过程；掌握分光光度计的使用、标准曲线的绘制及有关计算方法

目录content01测定原理02测定仪器和试剂03测定步骤

1测定原理

纳氏试剂分光光度法测定原理11?以游离态的氨或铵离子等形式存在的氨氮与纳氏试剂反应生成淡红棕色络合物，该络合物的吸光度与氨氮含量成正比，于波长420nm处测量吸光度。2K2(HgI4)+3KOH+NH3=[ONH2]I+7KI+2H2OHgHg

2测定仪器和试剂

测定的仪器和试剂12?仪器：除蒸馏-中和滴定法所需仪器外，还需要：可见光分光光度计及10/20/30mm比色皿；50ml具塞比色管；其他常用实验室仪器。

测定的仪器和试剂12?试剂：实验用水——无氨水想一想如何制备无氨水？标准溶液：氯化铵标液普通试剂：氢氧化钠、纳氏试剂·、硫酸锌等

3测定步骤

13测定步骤--样品的采集、保存与运输一次样品量：250ml，同时测定水温和pH值样品瓶处理：常规方法洗涤，避免接触含氮化合物样品保护：加硫酸，pH＜2存放条件：2~5℃，存放时间不超过7d预防措施：密封，防止空气中的氨污染运输条件：防撞击，防破碎

13测定步骤想一想如何制备无氨水？--样品预处理絮凝沉淀过滤络合掩蔽对于养殖后期水体中悬浮物较多的水体，经絮凝沉淀和络合掩蔽后，样品仍浑浊和带色，应用蒸馏法消除干扰。（同蒸馏滴定法）加入酒石酸钾钠溶液，以消除钙镁等金属离子的干扰。蒸馏必要时用经纯水冲洗过的中速滤纸过滤，弃去初滤液20ml。较清洁的养殖用水，在100ml水样中加入硫酸锌溶液1ml，加氢氧化钠溶液0.1~0.2ml，调节pH约10.5，混匀，放置使之沉淀，取上清液。

13测定步骤--标准曲线的制作1.加入氨氮标准溶液在8个50ml比色管中，分别加入0.00、0.50、1.00、2.00、4.00、6.00、8.00和10.00ml氨氮标准工作溶液，其所对应的氨氮含量分别为0.0、5.0、10.0、20.0、40.0、60.0、80.0和100μg；2.加水至标线3.加入1.0ml酒石酸钾钠溶液，摇匀4.加入纳氏试剂1.5ml或1.0ml，摇匀。5.放置10min后，在波长420nm下，用20mm比色皿，以水作参比，测量吸光度。

13测定步骤--标准曲线的制作以空白校正后的吸光度为纵坐标，以其对应的氨氮含量（μg）为横坐标，绘制校准曲线。样1水样2水样3氨标准使用液体积（ml）0.000.501.002.004.006.008.0010.005.005.005.00标准系列溶液浓度（ρ，mg/L）0.001.002.004.008.0012.0016.0020.00X1X2X3测量吸光度A0.0410.0780.1110.1790.2480.3890.5320.725矫正吸光度A0.0000.0370.0700.1380.2610.3950.5200.665

13测定步骤--样品的测定1.清洁水样：取适量于50ml比色管中，按与校准曲线相同的步骤测量吸光度。2.有悬浮物或色度干扰的水样：取经预处理的水样适量于50ml比色管中（若水样中氨氮质量浓度超过2mg/L，可适当少取水样体积），按与校准曲线相同的步骤测量吸光度。3.空白试验用水代替水样，按与样品相同的步骤进行前处理和测定。

13测定步骤--数据记录与处理样品中氨氮的吸光度Ar按下式计算：式中：As——样品测定的吸光度；Ab——空白试验的吸光度；氨氮含量为ρN（mg/L）按下式计算：式中：m——由标准曲线或回归方程计算得到的氨氮质量，μg；V——样品体积，ml。

13测定步骤●实训关键点及注意事项样品贮存要用硫酸酸化至pH2，在2~5℃下保存。但如果样品酸度过大，加入纳氏试剂后仍呈酸性，会出现红色沉淀，影响测定，应先把调节样品的pH到7左右。样品应在无氨的环境中测定，所用玻璃器皿应避免实验室空气中氨的污染，实验室内不应进行使用氨水等试剂的操作。纳氏试剂中碘化汞与碘化钾的比例，对显色反应的灵敏度有较大影响。静置后生成的沉淀应去除。长时间不用后再次使用时，以及仪器维修调整后应检查标准曲线，必要时应重新绘制。纳氏试剂中二氯化汞为剧毒物质，避免经皮肤和口腔接触。

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